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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
999
- 英文名:
King Medium A
- 保质期:
三年
- 供应商:
青岛海博
- 保存条件:
阴凉干燥处
- 规格:
250g
用途:用于绿脓杆菌的绿脓菌素测定试验。
成分(g/L):
| 蛋白胨 | 20.0 |
| 氯化镁 | 1.4 |
| 硫酸钾 | 10.0 |
| 琼脂 | 18.0 |
| pH值7.4 ± 0.1 | 25℃ |
检验原理
蛋白胨和甘油提供碳氮源;氯化镁和硫酸钾促进绿脓色素和荧光素的产生;琼脂是培养基的凝固剂。
用法
称取本品 49.4g,另称取 10g甘油,溶解于1000ml蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌 15 分钟,备用。
注:甘油需用户自备
注:培养基中含少量氯化镁,灭菌后可能出现微量沉淀。
绿脓菌素测定用培养基(PDP)中细菌的生长情况:

绿脓菌素生成试验方法及原理:
方法:挑取可疑菌落接种在在绿脓菌素测定用培养基(PDP)斜面上,培养24小时,观察斜面有无色素。如有色素,在试管内加氯仿3.0~5.0mL,充分震摇,使培养物中的绿脓菌素提取在氯仿中,待氯仿提取液呈现绿色时,加1mol/L盐酸约1mL,震摇后静置片刻,上层盐酸溶液中呈现粉红至红色实验结果为阳性,否则为阴性。
原理:铜绿假单胞菌能产生的绿脓菌素能被氯仿提取,且在水中溶解度比氯仿大,并且会发生可逆的氧化还原反应,氧化时碱性呈蓝色,酸性呈红色。所以加入盐酸溶液并震摇后,绿脓菌素会由氯仿转移至盐酸溶液中,并在酸性环境中呈红色。
绿脓菌素测定培养基(PDP)微生物灵敏度试验:
按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养24±2小时。

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文献和实验成分 胨 20g 麦芽糖 3g 乳糖 0.7g 氯化钠 5g 琼脂 15g 40%氢氧化钠溶液 1.5mL 蒸馏水 1000mL pH7.8 制法 用500mL蒸馏水溶解琼脂以外的成分,煮沸,并用滤纸过滤。用1mo1/L氢氧化钠校正pH。用另外500mL蒸馏水加热溶解琼脂。将两
甲基红试剂盒、HB8281 V-P试剂盒、HB8279 Kovacs氏靛基质试剂盒 铜绿假单胞菌 HB5187绿脓菌素测定培养基(PDP)、HB2100氧化酶试纸、HB8484假单胞菌产荧光色素培养基 枯草芽孢杆菌 HB8300芽孢染色液 白色念珠菌 HB7015念球菌显色培养基、HB0236-1 1%吐温80-玉米琼脂培养基
质量稳定性的重要影响因素。在细胞培养基M199中这三种维生素组分的含量在0.01μg/ml~0.14μg/ml之间,参考已报道的文献,脂溶性维生素的测定大都是含量较高的复合制品,而从含有61种成分的M199细胞培养基中提取这三种维生素并进行测定还未见报道[1~4]。由于这三种维生素的含量极低,在同一波长下难以同时测定三种组分,因此,我们采用可变波长UV检测器,利用多波长切换来分别测定VA、VD2和VE,以提高检测灵敏度,获得了良好的结果。 1实验部分 1.1 仪器和试剂
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