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- 文献和实验
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低温
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100
- 供应商:
上海信帆生物科技有限公司
- 规格:
0.5ml
常见的干扰物质有:类风湿因子、补体、嗜异性抗体、嗜靶抗原自身抗体、医源性诱导的抗鼠 Ig (s) 抗体、交叉反应物质和其它物质等。
(1)类风湿因子
中 IgM、IgG 型类风湿因子(RF)可以与 ELISA 试剂盒系统中的捕获抗体及酶标记二抗的 FC 段直接结合,从而导致假阳性。
解决该情况的办法有:
①用 F(ab)2 替代完整的 IgG;
②标本用联有热变性(63℃,10 min)IgG 的固相吸附剂处理(将热变性 IgG 加入到标本稀释液中同样有效);③检测抗原时,可以用 2-求基乙醇等加入到标本稀释液中,使 RF 降解。
(2)补体 ELISA 系统中固相一抗和标记二抗过程中,抗体分子发生变构,其 FC 段的补体 C1q 分子结合位点被暴露出来,使 C1q 可以将二者连接起来,从而造成假阳性。解决的办法是:①用 EDTA 稀释标本;②用 53℃,10 min 或 56℃,30 min 加热血清使 C1q 灭活。
(3)嗜异性抗体 人类血清中含有能与啮齿类动物(如鼠等)Ig (s) 结合的天然嗜异性抗体,可将 ELISA 系统中一抗和二抗连接起来,也能造成假阳性。解决的办法是:可在标本稀释液中加入过量的动物 Ig (s) ,但加入量不足或亚类不同时无效。
(4)嗜靶抗原的自身抗体 抗甲状腺球蛋白、抗胰岛素等嗜靶抗原的自身抗体,有时能与靶抗原结合形成复合物,在 ELISA 方法中均可干扰抗原抗体测定结果。为避免以上情况出现,解决的办法是:测定前需用理化方法将其解离后再测定。
(5)医源性诱导的抗鼠 Ig (s) 抗体 临床开展的用鼠源性 CD3 等单克隆抗体治疗,用放射性同位素标记鼠源性抗体的影像诊断及靶向治疗等,均有可能使这些体内产生抗鼠抗体;另外,被 鼠等啮齿类动物咬伤的体内也可以产生抗鼠 Ig (s) 抗体。这些 ELISA 测定时均可产生假阳性。解决的办法是:测定抗原时,在标本中加入足量的正常鼠 Ig (s) ,从而克服由于上述原因造成的假阳性。
(6)交叉反应物质 类地gao辛、类 AFP 样物质等,是与靶抗原有交叉反应的物质。在用多抗测定抗原时对测定结果影响不大,但在用单克隆抗体测定抗原时,如果交叉抗原决定簇正好是所用单克隆抗体相对应的靶决定簇时,也会出现假阳性结果。
(7)标本中其它成分的影响 血清脂质过高、胆红素、血红蛋白及血液粘度过大等,均对 ELISA 测定结果有干扰作用。
干扰物质使用说明书
用 途:适用于该产品对临检试剂干扰度评价时作为添加物
特 点:本品含有高浓度该物质,稳定性好,符合相关要求。
规 格:0.5ml/支
状 态:液体
贮 存:4-8℃温度保存,15天,-20℃冰冻保存18个月,-70℃超低温保存为佳稳 定 性:18个月
使 用:室温静置融化平衡,摇匀即可使用
1、本品在使用中应等同于临床标本处理。
2、请务必在稳定期之前使用。
常见干扰物质:
XFGR001 甘油三酯(TG)干扰物质 0.5ml/支 ≥30mmol/L
XFGR002 胆固醇(CHO)干扰物质 0.5ml/支 ≥18mmol/L
XFGR003 低密度脂蛋白(LDL)干扰物质 0.5ml/支 ≥900mg/dl
XFGR004 低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)干扰物质 0.5ml/支 ≥18mmol/L
XFGR005 总胆红素(T-bilirubin)干扰物质 0.5ml/支 ≥600umol/L
XFGR006 结合胆红素(D-bilirubin)干扰物质 0.5ml/支 ≥300umol/L
XFGR007 游离胆红素(bilirubin)干扰物质 0.5ml/支 ≥300umol/L
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文献和实验更高。 选择性:是分析方法在空白生物基质中存在潜干扰物质(非特异性干扰)的情况下区分和测定待测物的能力 。 高脂基质选择性的评价应使用至少一种来源的高脂基质。用于验证的基质应尽可能代表实际的试验样品。应尽量从甘油三酯水平异常高的受试者中获得。如果难以获得,虽然不能完全代表实际试验样品,也可以使用加入甘油三酯的基质。 溶血基质选择性的评价应使用至少一种来源的溶血基质,可通过向基质中添加溶血全血(至少 2% V/V)获得,以形成明显可检测的溶血样品。基质效应:基质效应是指由于生物基质中的干扰物质
法进行蛋白定量实验,制作标准曲线及测定样品时,为什么要将各试管中溶液纵向倒转混合?A1:将各试管中溶液纵向倒转混合目的是使反应充分,并且使整个反应液均一,否则在比色测定时,结果会有较大偏差,使标准曲线的制作不标准,后续的测定结果就不可靠。Q2: 采用Bradford法进行蛋白定量,样品中一般含哪些物质对此法有干扰,哪些物质对此法干扰很小或没有干扰?A2: 一般来说,样品中如含有K+ 、Na+ 、Mg2+、tris缓冲液、糖和蔗糖、甘油、巯基乙醇、EDTA等均不干扰此测定法;但仍有一些物质干扰此法
-250有红、蓝两种不同颜色的形式,在一定浓度的乙醇和酸性条件下,可配成淡红色的溶液,与蛋白结合后形成蓝色化合物,该化合物在595 nm处有最大吸收值,化合物颜色深浅与蛋白的浓度高低成正比。该法操作简便迅速,消耗样品量少,但不同蛋白质之间差异大,且标准曲线线性差。高浓度的Tris、EDTA、尿素、甘油、蔗糖、丙酮、硫酸铵和去污剂对测定有干扰。缓冲液浓度过高时,改变测定液pH值会影响显色。Lowry法(Folin-酚试剂法):福林-酚试剂(Folin-phenol reagent)的显色原理是:首先在
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