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文献和实验8.0) 、5 mmol/L MgCl2、蛋白酶混合抑制剂(表 6-1)。 ( 4 ) 100% PF-Percoll:0.8 g PEG 8000、0.27 g Ficoll 400000,加 Percoll 至最终体积为 27.5 ml。 ( 5 ) Percoll 梯度:PF Percoll ( 40% 或 85% ) 、0.5 mmol/L EDTA、50 mmol/L HEPES-KOH ( pH 8.0) 、330 mmol/L sorbitol。 ( 6 ) 浓缩
凝胶分离蛋白质。事实上,双向凝胶可以用于各种处理情况下的细胞蛋白质表达情况比较,如不同生理状态细胞,或某种的突变体或转基因植株,或药物处理,或受到不同刺激物刺激。特别是我们已经使用这种方法鉴定细胞增殖过程中的核蛋白质 [ 11] ,以及测定在国际空间站中由微重力而引起的表达变化 [ 12] 。2. 方法 2.1 植物材料和提取介质 ( 1 ) 萌芽:为了让洋葱鳞茎出根,使用圆桶状玻璃器皿,里面装过滤水(milli- RO4水 ;Millipore, Bedford MA
;g/ml 草酸, 7. 30 g/ml 钼酸根, 8. 10 g/ml 苯甲酸, 9. 10 g/ml 邻苯二甲酸, 10. 30 g/ml 硫氰根 混合涂非离子和阳离子表面活性剂的色谱柱 Same conditions as last Fig except the column was coated with a mixture of 5 mM DD and 2 mM Tween 20. Peak:
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