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上海玉博生物科技有限公司
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文献和实验WB010 蛋白酶+磷酸酶抑制剂混合物(20X) 1ml 380 WB011 流式用破膜剂 50T 1300 Invitrogen原装 WB012 淋巴细胞分离液(小鼠、大鼠、猪、兔等) 250ml
浓度为 0.02%。通常与 0.25% 的胰蛋白酶溶液按 1:1 混合使用(混合液)。注意:使用 EDTA 处理细胞后,一定要用 Hanks 液冲洗干净,因残留的 EDTA 会影响细胞生长。EDTA 溶液配制:用无钙、镁的 D-HBSS 平衡盐溶液溶解后,高压蒸汽灭菌,分装成小瓶, 室温或 4℃ 冰箱保存。胰蛋白酶–EDTA•4Na 溶液(0.05% 胰蛋白酶, 0.53 mM EDTA•4Na)0.5 g 胰蛋白酶+0.2 gEDTA•4Na+1L D-HBSS。-20℃ 冰箱中保存。pH
O 0.06g,加 H2O至 1000mlG1 注:Hank’s液可以高压灭菌。4℃下保存。 3、用手术剪将肝脏剪成小块(1mm2),再用 Hank’s液洗三次,转移至小青霉素瓶中。 4、视组织块量加入 5—6倍的 0.25%胰酶液,37℃中消化 20—40分钟,每隔 5分钟振荡一次,或用吸管吹打一次,使细胞分离。 5、加入 3—5ml培养液以终止胰酶消化作用(或加入胰酶抑制剂)。 6、静置 5—10分钟,使未分散的组织块下沉,取悬液加入到离心管中。 7、1000rpm,离心 10分钟,弃
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