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神经细胞培养

损伤和修复的研究日益受到重视。1、材料和方法 用12-14d 胚龄的小鼠、12-14d 胚龄的大鼠、 孵化10 d 的鸡胚，在无菌条件下取出胎鼠或鸡胚脊髓，剥除脊膜后,将整个脊髓腹侧面朝上置于平皿中，用微解剖镊和双面刀片沿脊髓中央管纵切两半，再将脊髓两侧的腹侧部分切下，将组织块切碎， 用0.125% 胰蛋白酶消化(37℃ 30min)分散后,用种植培养液(同第二节)稀释成5×105个细胞/ml密度的细胞悬液,接种于涂有小牛皮胶的35mm塑料培养皿中,每皿2ml,置36℃、10%CO2的培养箱中培养

大鼠脑微血管内皮细胞的分离与原代培养

)；DMEM培养液（含4000 mg/L D-葡萄糖，4 mmol/L L-谷氨酰胺，添加3.7 g/L NaHCO3，20 mmol/L HEPES，肝素钠 100 mg/L，青霉素 100 U/ml，链霉素 100 ug/ml），pH值调至7.4，过滤除菌后分装保存于4 ℃，用时加入20%FBS，1 ng/ml bFGF。 1.5 培养皿处理 涂布3种不同的基质：培养前一天加入1 ml 1%明胶于35mm塑料培养皿，置于37 ℃培养箱过夜，接种前用D-Hanks液漂洗2次；接种前4 h，加入鼠尾

【共享】RNA抽提实验注意事项，以及各种RNA的抽体的常用方法及步骤，还有质量鉴定的几种方法

ＲＮＡ酶。尽管现仍有Ｍacaloid出售ＮＬ Ｃhemicals）， 但氧钒核糖核苷复合物和ＲＮＡ酶的蛋白质抑制剂更常用。下述程序的优点是速度快，并能同时处理很多样品。一细胞的裂解a．单层细胞的裂解a）吸出培养液，以７ml用冰预冷的无钙镁离子磷酸缓冲盐溶液ＰＢＳ冲洗细胞培养皿内的单层细胞，重复１次，将平板置于冰上直至所有单层细胞冲洗完毕。也可将平板放在一块铝板上，再将铝板置于冰盘上。b）直径为90mm的培养皿需加0.5ml ＲＮＡ提取缓冲液， 并使之遍布整个平板的表面ＲＮＡ提取缓冲注液0.14mol