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上海玉博生物科技有限公司
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文献和实验已日渐明显。 一、 噬菌体展示技术的原理 噬菌体展示技术是将多肽或蛋白质的编码基因或目的基因片段克隆 入噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置,在阅读框正确且不影响其他外壳蛋白正常功能的情况下,使外源多肽或蛋白与外壳蛋白融合表达,融合蛋白随子代噬菌体的重新组装而展示在噬菌体表面。被展示的多肽或蛋白可以保持相对独立的空间结构和生物活性,以利于靶分子的识别和结合。肽库与固相上的靶蛋白分子经过一定时间孵育后,洗去未结合的游离噬菌体,然后以竞争受体或酸洗脱下与靶分子结合吸附的噬菌体,洗脱
表面,而体内组装是将含D融合基因的质粒转化入λD—溶源的E.Coli菌株中从而补偿溶源茵所缺的D蛋白,通过热诱导而被组装,或利用噬菌体P1的Cre—loxP定点重组系统将外源基因整合进入噬茵体基因组中。D蛋白展示系统的特点:因为是在病毒细胞内完成组装.无需将外源肽或蛋白分泌到细菌细胞膜,可以展示对细胞有毒性的蛋白。另外,D蛋白展示系统还可以用于cDNA文库的构建,抗原位点分析及作为基甲输送工具。Mikawa等对D蛋白的基因进行了改造,使外源序列在D蛋白的N端和C端都能插入,并成功地表面展示了有活性的葡萄
NEB的M13噬菌体随机肽库和NOVAGE的T7噬菌体肽库的优缺点?
各位好!我有几个关于PHAGE DISPLAY 问题想请教下你。请问一下Ph.D随机太库和M13 cDNA肽库两者的优缺点??各在什么情况下选择较佳?还有NOVEGEN 的预制人组织的cDNA文库原理,在什么情况下使用?我打算研究与睾丸组织中相互作用的蛋白,是否用NOVEGEN的预制人睾丸cDNA文库?最后,请问这些文库的代理商?噬菌体: M13KE T7宿主细胞 : ER2738 BL21/BLT5403/BLT5615噬菌体释放方式: M13噬菌体溶源性,不裂解宿主
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