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上海玉博生物科技有限公司
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文献和实验Reprogramming Fibroblasts with the CytoTune-iPS Reprogramming Kit
9. GlutaMAX™-I Supplement 10. Basic FGF, Recombinant Human 11. β-Mercaptoethanol, 1000X 12. Penicillin-Streptomycin, Liquid 13. Attachment Factor 14. TrypLE™ Select Cell Dissociation Reagent or 0.05% Trypsin/EDTA
在无血清细胞培养条件下将人 iPS 细胞体外分化为结肠类器官
-1000 移液器上下吹打 20 次以分散类器官沉淀团。 向类器官悬浮液中加入 5 mL 1X PBS,并在 4 °C 下以 700 x g 离心 5 分钟。如果上清液中存在残留的类器官碎片,则再离心 5 分钟。 吸出上清液并用 1 mL 3dGRO™ 类器官冷冻培养基 (SCM301) 重悬沉淀。 用 P-1000 移液器重悬沉淀 5 次,加入冷冻培养基以获得四个胶滴每毫升每管 将冷冻保存管中的细胞转移到冷冻容器(例如 Mr. Frosty)中,然后放入 -80 °C 冰箱中 24-72 小时
). 2. Stacking buffer (4×): 0.5 M Tris-HCl, pH 6.8, and 0.4%(w/v) SDS. Store at RT. 3. 30% acrylamide/bis solution (37.5:1 with 2.6% C) andN , N , N , N ¢-tetramethyl-ethylenediamine (TEMED; Bio-Rad,Hercules, CA). 4. Ammonium persulfate: prepare 10% (w/v
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