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上海玉博生物科技有限公司
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文献和实验Isolation of micro-RNA (miRNA)
in Table I, Processing Volumes for Animal Tissue . If isolating RNA from 50 μl of blood, use the quantities of reagents listed for 50 mg of tissue. If isolating RNA from 40 μl of blood, use the volumes recommended for 40 mg of tissue, etc. As volumes
最容易出错) (5)冰浴中,恒压60V转膜约1h。 (6)转膜后,用紫外交联仪固定RNA。 (7)42℃干燥15min。 4、杂交 (1)将膜放入50ml杂交管(也可使用普通50ml离心管,最好是螺纹旋转口的,不容易漏)中,用水侵润膜(注意将转有RNA的一面朝内,避免产生气泡)。 (2)加入4ml 预热(42℃提前预热)的杂交缓冲液(沿管壁缓慢加入,不要碰到膜),42℃旋转振荡30min。 (3)倒掉溶液,重新加入4ml 预热的杂交缓冲液,同时加入10μl miRNA探针(生物
什么是miRNA MicroRNAs (miRNAs)是一种大小约21—23个碱基的单链小分子RNA,是由具有发夹结构的约70-90个碱基大小的单链RNA前体经过Dicer酶加工后生成,不同于siRNA(双链)但是和siRNA密切相关。据推测,这些非编码小分子RNA(miRNAs)参与调控基因表达 ,但其机制区别于siRNA介导的mRNA降解。第一个被确认的miRNA 是在线虫中首次发现
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