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上海玉博生物科技有限公司
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文献和实验碳酸氢铵,pH 8.0。 ( 2 ) 胰蛋白酶:来源于牛胰腺的经 TPCK 处理的胰蛋白酶 (Sigma Aldrich, Fluka 产品)( 保存于 -20°C ) 。 ( 3 ) 胰凝乳蛋白酶: 来源于牛胰腺的经 TLCK 处理的胰凝乳蛋白酶(Sigma Aldrich) ( 保存于 -20°C ) 。 ( 4 ) C18 色谱柱:Merck C18 Spherisorb ODS 2 色谱柱(5 μm,4.6 mm X 250 mm,VWR)。 ( 5 ) 溶液
220 Gibco分装 B1092 DNAse Ⅰ,Bovine (脱氧核糖核酸酶) 25mg/100mg 230/430 Sigma分装 B1093 dNTP Mixture,50X (dNTP混合物) 4x 4uM/4x 10uM 160/350
一、材料和方法1、实验动物长白种系公猪,2月龄,由北京养猪中心苇沟现代化猪场提供。取活体睾丸,立即放入1640营养液中,待分离细胞。2、主要试剂及材料胶原酶(CLS,Sigma),胰蛋白酶(Sigma),脱氧核糖核酸酶(DNase,Promega),牛血清白蛋白(BSA,中国医学科学院天津血液研究所),胎牛血清(FBS,Gibco),RPMI 1640培养基(Gibco,临用前配制,加链霉素及青霉素至终浓度分别为100mg L及80IU ml,调pH至7 3),其他化学试剂均为国产分析
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