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上海玉博生物科技有限公司
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文献和实验血液基因组 DNA提取试剂盒操作指南(DP348) ——200μl~1ml 抗凝全血
以下操作按照天根产品 DP348 血液基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 抗凝血 200 μl~1ml抗凝全血2. 移液器及配套无菌枪头(200 μl ,1ml)3. 无水乙醇4. 涡旋振荡器,金属浴/水浴,台式离心机备注:本实验以人血为例,如提取哺乳动物全血可以用此流程,如果禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的抗凝血液,红细胞有核细胞,因此处理量为5-20 μl,当处理
1mL 细胞染色 buffer,300g 离心 5min,弃上清。 加入100μL 细胞染色 buffer,重悬细胞。 每管加入1mL 的 1× Fixation Working Solution,轻柔混匀,4℃ 避光孵育 30min。 600g 离心 5min,弃上清。 每管加入2mL 的 1×Permeabilization Working Solution,轻柔混匀。 600g 离心 5min,弃上清。 重复(6)、(7)步一次。 七、胞内抗体孵育 加入100μl 的1×
仿多次抽提.由于我手头的样品量相对充裕,所以小弟作了一些对照实验,以摸索比较优化的条件.现在将结果向各位战友汇报一下,希望能够对大家的实验有所帮助, 同时也以此向本版的”上海孤儿”大哥致敬,谢谢他以前为大家提供的无私帮助. 实验条件如下: 组织样品: 灵长类脑组织 提取试剂: Trizol 实验环境: 提取RNA专用超净台,进口无RNA酶枪头,其它实验用品如试管架等用实验前用75%酒精擦拭. 试验设计:每一管中都用100mg组织 lane1 1ml trizol 2,lane
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