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- 2025年07月11日
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文献和实验Collector，Pharmacia) （4）层析记录仪（Chart Recorder， Pharmacia) （5）层析柱（Hiprep 26/60 Sephacryl S-400 Size exclusion column， Pharmacia) 2、 试剂 层析缓冲液：20mM Tris(PH8.0)；150mM NaCl （4 o C预冷） 【操作步骤】 （1）准备好足够量的层析缓冲液，按照操作程序接好层析装置，将进样口与出样
Kamps's Western Blotting Protocol
from the shelf (Margie's).Stain for approximately 20 to 60 minutes.Rinse with water for 1 hr.Dry flat.Be careful.Buffers containing Tween 20 can reduce the binding of antiphosphotyrosine antibodies. Recipes Transfer buffer: Glycine 57.6 g Tris Base 12.0 g
有一次本人用HiPrep™ 26/60 Sephacryl S-200 HR以2ML/MIN的速度做GF纯化. 结果一时开小差 ,柱子严重进气 .严重到什么程度呢,60厘米的柱子上方20CM都空了,下面40CM则全都是气泡.本人发现后,立刻停泵,并经专家建议后采取以下措施: 1:将原来与柱子底部相连的增压器拆下,连到顶部. 2:翻转进液方向,由底部向顶部以最大速度输液,我记得好象是用了该柱子的最大流速. 结果,柱子恢复如常,其后的纯化曲线也未发现可测飘移
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