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上海玉博生物科技有限公司
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文献和实验。临用时加热溶化琼脂倾注平板。 59 氯化镁孔雀绿羧苄青霉素培养基成分:甲液:胰蛋白胨 10g蒸馏水 1000mL乙液:磷酸氢二钠 9.5g蒸馏水 1000mL丙液:氯化镁(MgCl2•6H2O) 40g蒸馏水 400mL以上分别在121℃灭菌15min。丁液:孔雀绿 0.2g蒸馏水 100mL戊液:羧苄青霉素 1mg/mL制法:取甲液620mL,乙液160mL,丙液212mL混合,再加入丁液6.4mL和戊液2.4mL,即为1000mL培养基。分装灭菌烧瓶,每瓶100mL,或灭菌试管10
一、目的与原理当细菌处于容易吸收外源DNA的状态时,即为感受态,而用理化手段使细菌处于感受态的操作为致敏过程。感受态细胞制备是重组基因能否实现转化的一个重要的技术环节。本试验是通过钙离子来诱导使之成为感受态细胞。二、材料和方法1. 材料:大肠杆菌2. 仪器:离心机,恒温摇床,恒温水浴,超净工作台,冰柜3. 试剂LB培养基,0.1M MgCl2,3mM氯化六氮合高钴TFB:10Mm MES(pH6.3)45Mm MnCl210Mm CaCl210Mm KCl三、操作步骤大肠杆菌在LB培养基平板
3. 试剂 LB培养基,0.1M MgCl2,3mM氯化六氮合高钴 TFB:10Mm MES(pH6.3) 45Mm MnCl2 10Mm CaCl2 10Mm KCl 三、操作步骤 大肠杆菌在LB培养基平板上划线培养12-16小时,挑取单菌落于LB培养基摇瓶培养大肠杆菌到对数期。取1ml培养物7000rpm,离心3min,收集菌体。再重复一次。冰浴放置。用预冷的氯化镁悬浮菌体7000rpm离心3min。收集
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