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上海玉博生物科技有限公司
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文献和实验Healthcare Life Sciences #17 - 1440 - 02) RPMI 1640 培养基(Invitrogen) 胎牛血清(FBS)(GIBCO) 双抗 P/S(Penicillin/ Streptomycin) (GIBCO) 二甲亚砜(DMSO)(SIGMA) 预先装好异丙醇的冻存盒 2. 方法/步骤 配制所需的溶液: a. 细胞培养基:RPMI 1640 + 10% FBS+ 1% P/S; b. 细胞冻存液:FBS 中加入 10%DMSO; (1)在离心管中加入淋巴
倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。 5. 细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15m培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。 6. 复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。 7. 加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题是DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少
,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5. 细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15m培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6. 复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中
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