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- 2025年07月10日
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文献和实验相关专题 Western是利用抗体检测蛋白常用的方法，本手册旨在表明Western-blot的技术原理、操作步骤及常见问题分析，可采用以下步骤进行Western-blot实验： Western-blot技术原理： Western Blot技术是通过聚丙烯酰胺凝胶电泳后，经PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体
分钟都有人在用。可在取胶的同时泡，估计前后5分钟左右。效果还不错。以前有站友发贴，说处理时间没多大关系，关键看膜的质量．确实是这样的。只要让膜完全浸透应该就没问题了。 Hybond的PVDF说明书这样的写的：“pre-wet the membrane in 100% methanol (10 seconds)”。 我的理解是，至少10秒钟，多泡下也没关系的，事实上，泡10秒的做过，10分钟的也做过，都没有问题的。 （2）转移 A. 在电转移仪上铺好下层滤纸。一般用三层。 B. 将膜
Semi-dry Transfer Apparatus Biorad, Cat# 170-3940, or equivalent Power Supply 0 - 100 VDC (adj. current to 1 Amp) Immobilon-Ptransfer membrane 0.45 µm pore size; cut to same size as gel (Millipore, Cat# IPVH304-FO, or equivalent) Filter Paper
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