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【原创】皮尔斯的发光底物比GE的差很多，多图

实验过程： 1. 将SIGMA公司HRP标记的羊抗兔1：10，000开始，5倍稀释。 点1ul到NC膜上，点完后迅速泡到PBS里。 2. 配好发光底物后取出膜，将SuperSignal West Pico与ELC prime 分别加200ul到两块膜上。1min后，在膜表面覆盖塑料膜。 3. 照相 4. 将照相后的膜使用蒸馏水冲洗，然后加入TMB显色底物显色，看两膜显色深浅有无差别。 结果：1. 发光情况 30s结果 1m30s 5m

凝胶迁移实验（EMSA）实验方法

和纤维垫。 （2）按如下顺序组装“三明治”：纤维垫，滤纸，凝胶，膜，滤纸，纤维垫。注意电极，确保凝胶位于阴极、膜位于阳极。 （3）在预冷的0.5XTBE中进行转膜。转膜装置应置于冰上或者低温室中，恒压60V转膜1h。（注意根据实际情况调整电压及时间）。 5、检测 （1）去除转好的膜，放入合适的盛有缓冲液的容器中，冲洗。（注意整个检测过程避免膜干燥） （2）去掉冲洗缓冲液，加入封闭液后轻微震荡，室温封闭20min。 （3）加入适量的HRP酶标记的链霉

Western-blot实验操作手册

上的蛋白质或多肽作为抗原 ，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。 实验步骤： Western，也称western blot 、Western blotting、Western印迹，是用抗体检测蛋白的重要方法之一。Western可以参考如下步骤进行操作。 1. 收集蛋白样品(Protein sample