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上海玉博生物科技有限公司
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文献和实验A:pET11/CyP A转化的大肠埃希菌BL21(DE3)常规培养表达[7]。收集菌体,超声裂解,离心取上清。50%饱和硫酸铵盐析,离心后沉淀用pH 7.8的Tris-HCl溶液溶解,对同种溶液透析,至透析液无NH+4存在。透析后粗提蛋白液行DEAE-Sepharose CL-4B柱层析,收集流穿蛋白,即rhCyP A,冷冻干燥保存。HPLC测得纯度>95%,SDS-PAGE显示为单一条带,分子量与标准CyP A(Boehringer Mannheim公司产品)一致。(2)HRP标记的抗人γ链F(ab
抗体(antibody,Ab)是机体免疫细胞被抗原激活后,由分化成熟的终末B细胞--浆细胞合成、分泌的一类能与相应抗原特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 抗体是具有4条多肽链的对称结构,其中2条较长、相对分子量较大的相同的重链(H链),含450?550个氨基酸残基,相对分子质量在55000?70000之间;2条较短、相对分子量较小的相同的轻链(L链),含210个氨基酸残基,相对分子质量约24000。链间由二硫键和非共价键联结形成一个由4条多肽链构成的单体分子
【摘要】目的 构建抗CD20嵌合抗体Fab'和F(ab)2片段表达载体,并在大肠杆菌中进行高效可溶性分泌表达,比较二者的活性差异。方法 从相应的杂交瘤中提取mRNA建立抗CD20 ScFv 噬菌体显示文库,利用PCR方法从阳性克隆扩增抗CD20抗体轻链可变区基因(VL)、重链可变区基因(VH),重组到表达载体pYZF1,构建抗CD20 Fab’和抗CD20 F(ab)2达载体pYZF1cd20和pYZcpp3,并在16c9菌中高效表达。MTT法测定Fab’和F(ab)2对Raji和Daudi
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