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小鼠腹水及单细胞悬液制备及注意事项

科镊子提起腹膜，用 5mL 注射器往小鼠腹腔注射 2.5mL 预冷 PBS（勿扎到脏器），轻揉小鼠腹部1~2 min。注射器回抽腹腔灌洗液，收集于15mL 离心管中。 重复第 5 步 5 次，冲洗腹腔，可观察到冲洗液逐渐澄清。 将收集的腹腔灌洗液 300 g 离心 5 min，弃上清。 用细胞染色缓冲液或者含 10% 胎牛血清的 1640 培养液重悬细胞。 进行细胞计数，并调整细胞浓度至 1×107/mL。 注意事项： 若第 7 步离心弃上清后发现细胞沉淀中有较多红细胞，且检测目的细胞非红细胞，先

胚胎小鼠纹状体神经干细胞的分离培养及鉴定

材料1、实验动物孕13d的昆明种二级小鼠。2、主要试剂主要试剂 来源DMEM/F12 GIBCOrh-EGF peprotechrh-bFGF peprotechB-27 supplement GIBCOHEPES SigmaTrypsin SigmaPloy-L-lysine Sigma胎牛血清（FBS） 杭州四季青公司青霉素 华美链霉素 华美胰酶阻断剂（STI） GIBCO葡萄糖 药剂科制剂室台盼蓝 西安化学试剂厂蔗糖 西安化学试剂厂酚红 西安化学试剂厂KH

细胞培养注意事项（入门级）

加抗生素。这个视情况而定。细胞培养过程中，是要求尽量少添加不相关的杂质。抗生素对于细胞来说，也是一种负担。但如果环境比较污染，直接添加好了。好比没病不用吃药，感冒了还是要吃药；婴儿没病但还是要打疫苗。第三，胎牛血清的解冻。血清一般保存于－20℃，要放在4℃冰箱解冻，耗时长，500mL要好几个小时，我们经常是头天离开实验室之前放到4℃冰箱，过夜。所以经常分装成10mL或者20mL。这样，上午放到4℃冰箱，下午就可以用了。第二，是否一定要细胞房。以及是否要完全严格的遵守种种器具专用。这个吧，见仁