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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 供应商:
上海一研
- 检测范围:
0.25ng/mL8ng/mL
- 检测方法:
ELISA Kit
- 应用:
0.1
- 适应物种:
详见说明书
- 标记物:
详见说明书
- 样本:
BPI
- 规格:
48T/96T
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人1-磷酸鞘氨醇(S1P)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人1-磷酸鞘氨醇(S1P)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样本处理及要求:
1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。 需要而未提供的试剂和器材: 1.酶标仪(450nm) 2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 3.37℃恒温箱 4.蒸馏水或去离子水
GPR21 G蛋白偶联受体21抗体
GPR22 G蛋白偶联受体22抗体
GPR25 G蛋白偶联受体25抗体
GPR26 G蛋白偶联受体26抗体
GPR27 G蛋白偶联受体27抗体
GPR3 G蛋白偶联受体3抗体
GPR31 G蛋白偶联受体31抗体
GPR32 G蛋白偶联受体32抗体
GPR34 G蛋白偶联受体34抗体
GPR35 G蛋白偶联受体35抗体
GPR37 G蛋白偶联受体37/帕金森相关内皮素受体样受体抗体
GPR40 G蛋白偶联受体40抗体
GPR43 G蛋白偶联受体43抗体
GPR44 G蛋白偶联受体44抗体
GPR45 G蛋白偶联受体45抗体
GSC 同源盒蛋白GSC抗体
Gemin 4 脊髓性肌萎缩症蛋白Gemin4抗体
Gemin 5 脊髓性肌萎缩症蛋白Gemin5抗体
Gemin 7 脊髓性肌萎缩症蛋白Gemin7抗体
GEM GTP结合丝裂原诱导T细胞蛋白抗体
GEMC1 染色体卷曲螺旋域包含蛋白1抗体
Gemin 6 脊髓性肌萎缩症蛋白Gemin6抗体
phospho-GFAP 磷酸化胶质纤维酸性蛋白抗体
GFI1 自主生长因子GFI1抗体
GPR109A G蛋白偶联受体109A抗体
GGA1 γ-衔接蛋白相关蛋白1抗体
GGA2 γ-衔接蛋白相关蛋白2抗体
GGA3 γ-衔接蛋白相关蛋白3抗体
GGN 配子生成素抗体
GGT2 heavy chain γ谷氨酰转肽酶2重链抗体
GGT5 heavy chain γ-谷氨酰转肽酶5重链抗体
phospho-GATA3 磷酸化GATA结合蛋白3抗体
小鼠杀菌性;通透性增加蛋白ELISA检测试剂盒说明书phospho-GATA3 磷酸化GATA结合蛋白3抗体
GFM2 延伸因子G2抗体
Glucoamylase 葡糖淀粉酶抗体
GFPT1 谷氨酰胺6-磷酸果糖转移酶抗体
GSTT1 谷胱甘肽S转移酶θ抗体
GSTT2 谷胱甘肽S转移酶θ2抗体
GGT6 γ-谷氨酰转肽酶6抗体
GZMA/Granzyme A 颗粒酶A抗体
Granzyme D/B/E/N/G/F/H 颗粒酶D/B/E/N/G/F/H抗体
G-CSFR/CD114/GCSF Receptor 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子3受体抗体
GPA/GYPA/CD235a 血型糖蛋白A/涎糖蛋白抗体
GPATCH3 G蛋白修补结构域蛋白3抗体
GPR63 G蛋白偶联受体GPR63蛋白抗体
phospho-GATA1 磷酸化珠蛋白转录因子1抗体
GPR109A G蛋白偶联受体109A抗体
GPR15 G蛋白偶联受体15抗体
IL3RB 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子受体β抗体
GAS8 生长停滞特异性蛋白8抗体
GPR135 G蛋白偶联受体GPR135蛋白抗体
Glypican 5 磷脂酰基醇蛋白聚糖-5抗体
GADD45GIP1 GADD45γ相互作用蛋白1抗体
GTPBP4 GTP结合蛋白4抗体
phospho-GABBR1 磷酸化gamma氨基丁酸B型受体1抗体
phospho-Gria2 磷酸化谷氨酸受体2抗体
phospho-GNA12 磷酸化鸟苷酸调节蛋白12抗体
GATA-1 珠蛋白转录因子1抗体
GPX3 谷胱甘肽过氧化酶3
GPX4 谷胱甘肽过氧化酶4抗体
GOLPH2 高尔基体膜蛋白GP73抗体
GPR172B G蛋白偶联受体172B抗体
GCET2 生发中心B淋巴细胞相关蛋白2抗体
GNAT3 G蛋白转录因子α3抗体
GPR124 G蛋白偶联受体124抗体
Galectin 1 半乳糖凝集素1抗体
GANAB α葡萄糖苷酶2抗体
Galectin 7 半乳糖凝集素7抗体
GCDFP15 特异性囊肿病液体蛋白15抗体
GCET1 B淋巴细胞生发中心相关蛋白抗体
GASC1 鳞状细胞癌增强蛋白1抗体
G alpha gust Gα gust抗体
GLS1 谷氨酰胺酶抗体
GCMA 绒毛膜特异性转录因子GCMa抗体
GBP5 G蛋白结合蛋白5抗体
Cancer/testis antigen family 4 member 7 肿瘤/睾丸抗原抗体家族4亚型7抗体
GFR alpha 3 GDNF家族受体α3抗体 GFR α3
GLRB 甘氨酸受体β/GlyR β抗体
GALP 神经甘丙肽样肽GALP抗体
GALR2 甘丙肽受体2抗体
GALR3 甘丙肽受体3抗体
Ghrelin Receptor 脑肠肽受体抗体
GRC5 GRC5蛋白抗体
Gbx1 肠和大脑特定同源蛋白1抗体
GDF6 生长分化因子6抗体
GEFT 鸟嘌呤核苷酸交换因子GEFT抗体
GMF beta 胶浆成熟因子β抗体
注意事项:
1.严格按照规定的时间和被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果。引起ELISA测定错误结果的原因主要有:
①标本因素;
②试剂因素;
③操作因素。
特点:
1、适用于血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
2、可检测动物类型丰富:人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、兔、猪、犬、牛、绵羊、鸡、虾、鱼等。
3、可检测指标齐全:白介素,干扰素,肺炎衣原体,血管紧张素,炎症因子、血管生成素、动脉粥样硬化因子、趋化因子、生长因子基质金属蛋白酶、脂肪因子等等指标。
自备材料:
1)蒸馏水。
2)加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3)振荡器及磁力搅拌器等。
安全性:
1)避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2)实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3)不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作步骤
1)使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。 2)根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
3)加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5)每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7)每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8)取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9)在450nm波长处测定各孔的OD值。
进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2.洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3.消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。
4.底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。
5.避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6.在储存和温育时避免强光直接照射。
7.平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8.任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
9.不能使用过期产品。
10.如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验抗原和抗体的来源,索要试剂盒说明书,然后利用网络确认这些信息,正规的ELISA生产商,这些信息都是非常齐全,如果信息不全,则该ELISA的制造水平和质量都会很差。造假三:某些奸商为了夸大其生产ELISA涵盖的指标的范围,用一种指标来冒充其它指标,造成各种种属、各种指标都可以做的假象。比如用TGFβ这样的指标代替大多数试剂盒的其他指标作为检测抗体,同样可以获得良好的标准曲线。因为TGFβ在大多数哺乳类动物中(人、大鼠、小鼠、猪、牛……)都有广泛表达,种属间抗原的氨基酸序列同源性达100%,TGF
、Caspase-3 Intracellular Acitivity Assay Kit I ( 绿色荧光) 目录号:235430 包装:30T/Kit 本试剂盒提供了一种可用于检测凋亡过程中活细胞内Caspase-3 或类Caspase-3 酶的活性的方法。实验结果可用流式细胞仪或荧光显微镜检测。本试剂盒可被用于检测潜在物质或药物对Caspase-3 活性的激动或抑制能力。本试剂盒原理基于胞内的酶与细胞通透性的PhiPhiLux?G1D2 相互反应,每个底物分子含有两个荧光基团 19
多篇 SCI 发现用 RIPA 提蛋白存在问题,我们该如何应对?
90, c-Src, 和 tubulin,表明这些蛋白在 RIPA 不可溶组分中大量存在(下图)。Wang 等 [6] 对比 SDS 加热法和 RIPA 裂解液法从斑马鱼肝脏肿瘤中提取蛋白,发现 RIPA 裂解液提取这些样品时对于大分子量蛋白的提取效率十分低(下图)。Li[7] 对比了从小鼠脾脏和肝脏中提取总蛋白 RIPA 可溶和不可溶性组分以及基于离心管柱法商业试剂盒提取的蛋白质图谱,发现 RIPA 不可溶组分蛋白质图谱与可溶性组分图谱相似,但是不完全相同。这些丢失的不可溶组分覆盖了整个蛋白质图谱分子
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