小鼠髓鞘转录因子1ELISA试剂盒

小鼠髓鞘转录因子1ELISA检测试剂盒说明书实验原理:
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人1-磷酸鞘氨醇（S1P）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人1-磷酸鞘氨醇（S1P）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

样本处理及要求:
1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。 注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。 需要而未提供的试剂和器材: 1.酶标仪（450nm） 2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 3.37℃恒温箱 4.蒸馏水或去离子水

LGI4    含亮氨酸神经胶质瘤失活蛋白4抗体
LYL1    淋巴细胞性白血病相关序列1抗体
L-Citrulline    L-瓜氨酸抗体
Legumain    半胱氨酸蛋白酶抗体
LDHD    乳酸脱氢酶D抗体
LYK5    蛋白激酶LYK5抗体
lipotropin gamma    促脂素gamma抗体
Lamin B Receptor    核纤层蛋白B受体抗体
Ceramide synthase 1    长寿相关基因lASS1抗体
LASS6    长寿相关基因lASS6抗体
LASS5    长寿相关基因lASS5抗体
LASS3    长寿相关基因lASS3抗体
Ceramide synthase 2    肿瘤转移抑制基因1抗体
LASS4    长寿相关基因lASS4抗体
Lin-28B    RNA结合蛋白LIN28B抗体
Lin28    RNA结合蛋白LIN28抗体
LPL protein    内皮脂肪酶抗体
Ly-6G/Gr-1    淋巴细胞抗原抗体6G抗体
LGI1    富含亮氨酸胶质瘤失活蛋白1抗体
Laminin 5    层粘连蛋白5抗体
Lactoperoxidase    唾液过氧化物酶LPO抗体
lysozyme    溶菌酶抗体
lysozyme    溶菌酶抗体
LAD1    LAD1蛋白抗体
LAP2 alpha    胸腺生成素LAP2抗体
LRRC6    富含亮氨酸重复蛋白6抗体
LRP12    低密度脂蛋白受体相关蛋白12抗体
phospho-LLGL1 + LLGL2    磷酸化相似肿瘤抑制基因HUGL抗体
LDL receptor    低密度脂蛋白受体抗体
Leptin    瘦素抗体
LMO4    乳腺肿瘤自身抗原抗体LMO4抗体
Lck/p56-LCK    淋巴细胞特异性蛋白酪氨酸激酶抗体
CD85c    白细胞免疫球蛋白样受体8抗体
LTB4-R1/BLTR    白三烯B4受体1抗体
LIR-6    白细胞免疫球蛋白样受体6抗体
LAG-3/CD223    淋巴细胞活化基因-3抗体
LAIR-1    白细胞相关免疫球蛋白样受体1抗体
Langerin/CD207    白细胞分化抗原抗体CD207抗体
LTB4-R2    白三烯B4受体2抗体
LAIR-2    白细胞相关免疫球蛋白样受体2抗体
LLGL1    相似肿瘤抑制基因HUGL抗体
IL-1 Beta    白介素1β抗体
Beta-lactoglobulin    β-乳球蛋白抗体
LPPR1    脂质磷酸磷酸酶相关蛋白1/可塑性相关基因3抗体
LRFN1    神经突触粘附样分子1抗体
LRCH1    富含亮氨酸重复家庭蛋白1抗体
LRCH4    富含亮氨酸重复家庭蛋白4抗体
Leptin receptor    瘦素受体抗体
LIF    白血病抑制因子抗体
Lingo-1    Nogo受体反应蛋白抗体
Livin    凋亡抑制蛋白抗体
laminin    层粘连蛋白抗体
Lpin1 protein    Lpin1 抗体
Lpin1 protein    Lpin1 抗体
Lysozyme    溶菌酶抗体
Iumbrokinase    蚓激酶抗体
小鼠髓鞘转录因子1ELISA检测试剂盒说明书Leptin    瘦素抗体
Leptin receptor    瘦素受体抗体
Leptin receptor    瘦素受体抗体
LCE1A    晚期包膜蛋白1抗体
LANPL    富含亮氨酸样酸性核蛋白抗体
LCE2B    晚期包膜蛋白2B抗体
LIPK    脂肪酶家庭成员K抗体
Stathmin    白血病相关蛋白18/癌蛋白18抗体
LIS1    无脑回的致病基因LIS1抗体
LAMP3    溶酶体相关膜蛋白3抗体
L-ENK    亮氨酸脑啡肽抗体
LC3B/MAP LC3β/MAP1A    自噬微管相关蛋白轻链3抗体
LMX1b    指甲髌骨综合征相关蛋白NPS1抗体
LC3B    自噬微管相关蛋白轻链β3抗体
LRRC59    LRRC59蛋白抗体
LRRC41    LRRC41蛋白抗体
LHR    促黄体生成素受体抗体
alpha Lactalbumin    乳清蛋白α抗体
Lamin B2    核纤层蛋白B2抗体
Laminin alpha 5    层粘蛋白α5抗体
L-Citrulline    L-瓜氨酸抗体注意事项:
1.严格按照规定的时间和被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多，而且其操作中有一定的技术要求，在检测过程中除正常反应外，有时常见到一些错误的结果。引起ELISA测定错误结果的原因主要有：
①标本因素；
②试剂因素；
③操作因素。

特点:
1、适用于血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
2、可检测动物类型丰富：人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、兔、猪、犬、牛、绵羊、鸡、虾、鱼等。
3、可检测指标齐全：白介素，干扰素，肺炎衣原体，血管紧张素，炎症因子、血管生成素、动脉粥样硬化因子、趋化因子、生长因子基质金属蛋白酶、脂肪因子等等指标。
自备材料:
1）蒸馏水。
2）加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3）振荡器及磁力搅拌器等。
安全性:
1）避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2）实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3）不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

操作步骤
1）使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。 2）根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。
3）加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
4）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
5）每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
6）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
7）每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
8）取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
9）在450nm波长处测定各孔的OD值。
进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2.洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3.消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。
4.底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。
5.避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6.在储存和温育时避免强光直接照射。
7.平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8.任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
9.不能使用过期产品。
10.如果可能传播疾病，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。