小鼠绒毛膜促性腺激素ELISA试剂盒

小鼠绒毛膜促性腺激素ELISA检测试剂盒说明书实验原理:
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人1-磷酸鞘氨醇（S1P）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人1-磷酸鞘氨醇（S1P）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

体
phospho-APC1     磷酸化细胞周期末期促进复合蛋白APC1抗体
ANAPC1    细胞周期末期促进复合蛋白APC1抗体
phospho-AKT2     磷酸化蛋白激酶B2抗体
phospho-APBB1     磷酸化铁蛋白Fe65抗体
phospho-APBB1     磷酸化铁蛋白Fe65抗体
phospho-Amyloid Precursor Protein     磷酸化APP淀粉样肽前体蛋白抗体
phospho-Amyloid Precursor Protein     磷酸化APP淀粉样肽前体蛋白抗体
phospho-ATF2     磷酸化活化复制因子2抗体
phospho-ATF2     磷酸化活化复制因子2抗体
phospho-APC1     磷酸化细胞周期末期促进复合蛋白APC1抗体
ASAP1    发育分化增强因子1抗体
phospho-ASAP1     磷酸化发育分化增强因子1抗体
AKT3    蛋白激酶B3
Girdin    肌动蛋白结合蛋白Girdin抗体
AKAP2    蛋白激酶A2抗体
AT2R2    血管紧张素Ⅱ受体2抗体
ASH1L    ASH1蛋白抗体
AADACL2    芳香乙酰胺脱乙酰基酶样蛋白2抗体
AAMP    血管内皮细胞迁移蛋白抗体
AKR1B10    醛糖还原酶相关蛋白质抗体
AKR1C2    胆汁酸结合蛋白DDH2抗体
ANGPTL3    血管生成素样蛋白3抗体
Acylglycerol Kinase    甘油酯激酶线粒体抗体
phospho-alpha Adducin    磷酸化内收蛋白a1抗体
ATG16L2    自噬体ATG16L2蛋白抗体
ACPT    睾丸酸性磷酸酶抗体
Acid Phosphatase    酸性磷酸酶抗体
AKIP    极光激酶A相互作用蛋白1抗体
APOL6    载脂蛋白样蛋白6抗体
ARTS    凋亡相关蛋白TGFb信号抗体
A2LD1    A2LD1蛋白抗体
A4GNT    α1,4-N-乙酰葡糖胺转移酶α4Gn-T抗体
AADAC    芳香乙酰胺脱乙酰基酶抗体
AADACL4    芳香乙酰胺脱乙酰基酶样蛋白4抗体
AASDHPPT    氨基乙二酸半醛脱氢酶磷酸泛酰巯基乙胺转移酶抗体
AASS    赖氨酸酮戊二酸还原酶抗体
ANKRD6    锚蛋白重复域6抗体
Arginase II    精氨酸酶2抗体
AKR1C3    醛固酮还原酶家族1成员C3抗体
ACTHR    促肾上腺皮质激素受体
小鼠绒毛膜促性腺激素ELISA检测试剂盒说明书AGRP    褐黑素相关蛋白ART抗体
Adrenodoxin    肾上腺皮质线粒体铁氧还蛋白抗体
Adracalin    Allgrove综合征相关蛋白抗体
AAV5 capsid protein VP1    腺相关病毒5 VP1抗体
ALDH3A2    脂肪醛脱氢酶抗体
AVPR1A    抗利尿激素1A抗体
AVPR1B    抗利尿激素受体1B抗体
ARFGEF2    二磷酸腺苷核糖基化因子鸟嘌呤核苷酸交换因子2抗体
ATBF1    α增强子结合蛋白1抗体
ATXN10    脊髓小脑共济失调10抗体
AKAP7    蛋白激酶A锚定蛋白7抗体
ABCA12    腺苷三磷酸结合盒转运体12抗体
ABCB9    腺苷三磷酸结合盒转运体9抗体
ABCD4    三磷酸腺苷结合盒转运蛋白4抗体
ABLIM3    肌动蛋白结合蛋白LIM3抗体
ACBD3    高尔基复合体相关蛋白1抗体
ACACA    乙酰辅酶A羧化酶1ACCα抗体
ANT1+ANT2+ANT3+ANT4    腺嘌呤核苷酸转运蛋白1、2、3、4抗体
ADAM12    去整合素样金属蛋白酶12
Phospho-Acetyl CoA Carboxylase    磷酸化乙酰辅酶A羧化酶1ACCα抗体
AX2R    膜粘连蛋白2受体抗体
AGER    晚期糖基化终末产物特异性受体抗体
ADCK5    ADCK5蛋白抗体
AGFG1    艾滋病病毒复制结合蛋白抗体
AFP4b    AFP4b蛋白抗体
AGFG2    HIV-1病毒复制结合蛋白2抗体
CABC1    伴侣蛋白bc1同源复合体抗体
ANKRD1    心肌锚蛋白重复结构域1抗体
ARRDC1    抑制蛋白结构域蛋白1抗体
ARRDC2    抑制蛋白结构域蛋白2抗体
ARRDC3    抑制蛋白结构域蛋白3抗体
ARRDC4    抑制蛋白结构域蛋白4抗体
alpha Estradiol    雌二醇抗体
APLP2    淀粉样蛋白β前体样蛋白2抗体
APLP1    淀粉样蛋白β前体样蛋白1抗体
APC70    转录激活蛋白crsp70抗体
ACTBL1    卵巢、胎盘、前列腺、睾丸蛋白22抗体样本处理及要求:
1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。 注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。 需要而未提供的试剂和器材: 1.酶标仪（450nm） 2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 3.37℃恒温箱 4.蒸馏水或去离子水

注意事项:
1.严格按照规定的时间和被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多，而且其操作中有一定的技术要求，在检测过程中除正常反应外，有时常见到一些错误的结果。引起ELISA测定错误结果的原因主要有：
①标本因素；
②试剂因素；
③操作因素。

特点:
1、适用于血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
2、可检测动物类型丰富：人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、兔、猪、犬、牛、绵羊、鸡、虾、鱼等。
3、可检测指标齐全：白介素，干扰素，肺炎衣原体，血管紧张素，炎症因子、血管生成素、动脉粥样硬化因子、趋化因子、生长因子基质金属蛋白酶、脂肪因子等等指标。
自备材料:
1）蒸馏水。
2）加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3）振荡器及磁力搅拌器等。
安全性:
1）避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2）实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3）不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

操作步骤
1）使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。 2）根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。
3）加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
4）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
5）每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
6）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
7）每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
8）取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
9）在450nm波长处测定各孔的OD值。
进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2.洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3.消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。
4.底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。
5.避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6.在储存和温育时避免强光直接照射。
7.平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8.任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
9.不能使用过期产品。
10.如果可能传播疾病，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。