小鼠低氧诱导因子-1αELISA试剂盒

小鼠低氧诱导因子-1αELISA检测试剂盒说明书实验原理:
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人1-磷酸鞘氨醇（S1P）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人1-磷酸鞘氨醇（S1P）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

GFPT1    谷氨酰胺6-磷酸果糖转移酶抗体
GSTT1    谷胱甘肽S转移酶θ抗体
GSTT2    谷胱甘肽S转移酶θ2抗体
GGT6    γ-谷氨酰转肽酶6抗体
GZMA/Granzyme A    颗粒酶A抗体
Granzyme D/B/E/N/G/F/H    颗粒酶D/B/E/N/G/F/H抗体
G-CSFR/CD114/GCSF Receptor    粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子3受体抗体
GPA/GYPA/CD235a    血型糖蛋白A/涎糖蛋白抗体
GPATCH3    G蛋白修补结构域蛋白3抗体
GPR63    G蛋白偶联受体GPR63蛋白抗体
phospho-GATA1(Ser161)    磷酸化珠蛋白转录因子1抗体
GPR109A    G蛋白偶联受体109A抗体
GPR15    G蛋白偶联受体15抗体
IL3RB    粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子受体β抗体
GAS8    生长停滞特异性蛋白8抗体
GPR135    G蛋白偶联受体GPR135蛋白抗体
Glypican 5    磷脂酰基醇蛋白聚糖-5抗体
GADD45GIP1    GADD45γ相互作用蛋白1抗体
GTPBP4    GTP结合蛋白4抗体（慢性肾功能衰竭蛋白）
phospho-GABBR1 (Ser923)    磷酸化gamma氨基丁酸B型受体1抗体
phospho-Gria2 (Ser880)    磷酸化谷氨酸受体2抗体
phospho-GNA12(Ser68)    磷酸化鸟苷酸调节蛋白12抗体
GATA-1    珠蛋白转录因子1抗体
GPX3    谷胱甘肽过氧化酶3
GPX4    谷胱甘肽过氧化酶4抗体
GOLPH2    高尔基体膜蛋白GP73抗体
GPR172B    G蛋白偶联受体172B抗体
GCET2    生发中心B淋巴细胞相关蛋白2抗体
GNAT3    G蛋白转录因子α3抗体
GPR124    G蛋白偶联受体124抗体（肿瘤血管内皮标记物）
Galectin 1    半乳糖凝集素1抗体
GANAB    α葡萄糖苷酶2抗体
Galectin 7    半乳糖凝集素7抗体
GCDFP15    特异性囊肿病液体蛋白15抗体
GCET1    B淋巴细胞生发中心相关蛋白抗体
GASC1    鳞状细胞癌增强蛋白1抗体
G alpha gust    Gα gust抗体
GLS1    谷氨酰胺酶抗体
GCMA    绒毛膜特异性转录因子GCMa抗体
GBP5    G蛋白结合蛋白5抗体
小鼠低氧诱导因子-1αELISA检测试剂盒Cancer/testis antigen family 4 member 7    肿瘤/睾丸抗原家族4亚型7抗体
GFR alpha 3    GDNF家族受体α3抗体 GFR α3
GLRB    甘氨酸受体β/GlyR β抗体
GALP    神经甘丙肽样肽GALP抗体
GALR2    甘丙肽受体2抗体
GALR3    甘丙肽受体3抗体
Ghrelin Receptor    脑肠肽受体抗体
GRC5    GRC5蛋白抗体
Gbx1    肠和大脑特定同源蛋白1抗体
GDF6    生长分化因子6抗体
GEFT    鸟嘌呤核苷酸交换因子GEFT抗体
GMF beta    胶浆成熟因子β抗体
GPR56    蛋白偶联受体56抗体
Gbx2    肠和大脑特定同源蛋白2抗体
Glyt1    甘氨酸转运蛋白1抗体
Gsh1    生长激素释放激素同源盒蛋白1抗体
GYPB    血型糖蛋白δ抗体
GluR1    谷氨酸受体1抗体
OR10A5    味觉受体蛋白家族10亚基5抗体
phospho-GluR1 (Ser863)    磷酸化谷氨酸受体1抗体
phospho-GluR1 (Ser645)    磷酸化谷氨酸受体1抗体
phospho-GluR1(Ser831)    磷酸化谷氨酸受体1抗体
GPR48    G蛋白偶联受体48抗体
GABRA2    G氨基丁酸A型受体α2/GABAA Rα2抗体
GABRA4    G氨基丁酸A型受体α4/GABAA Rα4抗体
GABRA6    G氨基丁酸A型受体α6/GABAA Rα6抗体
phospho-GARB1 (Ser434)    磷酸化γ1氨基丁酸受体GABAA Rβ1抗体
GABRB2    G氨基丁酸受体β2/GABAA Rβ2抗体
GPR17    G蛋白偶联受体17抗体
GPR102    G蛋白偶联受体102抗体
GPR136    G蛋白偶联受体136抗体
GPR126    G蛋白偶联受体126抗体
GPR105    G蛋白偶联受体105抗体
GPRC5B    G蛋白偶联受体C5B抗体
GPCR6A    G蛋白偶联受体33抗体
GRIK1    谷氨酸受体红藻氨酸离子1抗体
GRASP    一般受体磷酸肌醇相关支架蛋白1抗体样本处理及要求:
1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。 注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。 需要而未提供的试剂和器材: 1.酶标仪（450nm） 2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 3.37℃恒温箱 4.蒸馏水或去离子水

注意事项:
1.严格按照规定的时间和被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多，而且其操作中有一定的技术要求，在检测过程中除正常反应外，有时常见到一些错误的结果。引起ELISA测定错误结果的原因主要有：
①标本因素；
②试剂因素；
③操作因素。

特点:
1、适用于血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
2、可检测动物类型丰富：人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、兔、猪、犬、牛、绵羊、鸡、虾、鱼等。
3、可检测指标齐全：白介素，干扰素，肺炎衣原体，血管紧张素，炎症因子、血管生成素、动脉粥样硬化因子、趋化因子、生长因子基质金属蛋白酶、脂肪因子等等指标。
自备材料:
1）蒸馏水。
2）加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3）振荡器及磁力搅拌器等。
安全性:
1）避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2）实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3）不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

操作步骤
1）使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。 2）根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。
3）加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
4）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
5）每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
6）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
7）每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
8）取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
9）在450nm波长处测定各孔的OD值。
进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2.洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3.消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。
4.底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。
5.避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6.在储存和温育时避免强光直接照射。
7.平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8.任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
9.不能使用过期产品。
10.如果可能传播疾病，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。