小鼠UDP葡萄糖ELISA试剂盒

小鼠UDP葡萄糖ELISA检测试剂盒说明书实验原理:
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人1-磷酸鞘氨醇（S1P）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人1-磷酸鞘氨醇（S1P）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

Carboxypeptidase H    胰羧肽酶E抗体
phospho-CK18(Ser60)    磷酸化细胞角蛋白18抗体
C20orf112    20号染色体开放阅读框112抗体
C10orf88    10号染色体开放阅读框88抗体
CRCT1    富含半胱氨酸C端蛋白1抗体
CREG2    E1A激活基因刺激蛋白2抗体
CWH43    细胞壁合成蛋白43抗体
C19orf29    19号染色体开放阅读框29抗体
phospho-CDKN1A (Ser130)    磷酸化p21蛋白抗体
Phospho-CHK2 (Thr387)    磷酸化细胞周期检测点激酶2抗体
phospho-CaMK2 alpha (Thr305)    磷酸化钙/钙调素依赖蛋白激酶2α抗体
Phospho-CDK2 (Thr14)    磷酸化周期素依赖性激酶2抗体
phospho-CHEK1 (Ser345)    磷酸化细胞周期检测点激酶1抗体
phospho-CDKN1B (Thr198)    磷酸化P27抗体/周期素依赖激酶抑制剂抗体
phospho-CTNNA1 (Ser641)    磷酸化α-连环蛋白抗体
Cyclin E2    周期素E2抗体
phospho-CaMK2 beta gamma delta (Thr287)    磷酸化钙/钙调素依赖蛋白激酶CAMK2B/D/G抗体
CASC3    肿瘤易感候选基因3抗体
phospho-CASC3(Tyr181)    磷酸化肿瘤易感候选基因3抗体
phospho-CREB-1(Ser142)    磷酸化CREB-1抗体
phospho-CREB-1(Ser121)    磷酸化CREB-1抗体
小鼠UDP葡萄糖ELISA检测试剂盒phospho-CDK6 (Tyr24)    磷酸化周期素依赖性激酶6抗体
CBL2    原癌基因CBL2抗体
phospho-CBL2 (Tyr674)    磷酸化原癌基因CBL2抗体
CTNNBIP1    β链接素相互作用蛋白1抗体
phospho-CTNNBIP1 (Thr43+Ser50)    磷酸化β链接素相互作用蛋白1抗体
phospho-Beta catenin (Tyr86)     磷酸化β 连环素蛋白抗体
Chloroplast protease    叶绿体蛋白酶抗体（植物）
phospho-CDC27 (Ser427)    磷酸化后期促进复合蛋白3抗体
Phospho-Cofilin (Tyr140)    磷酸化丝切蛋白抗体
phospho-CFL1 (Tyr89)    磷酸化丝切蛋白抗体
Phospho-CHK2 (ser33)    磷酸化细胞周期检测点激酶2抗体
Phospho-cdc25A (Ser178)    磷酸化细胞分裂周期蛋白25抗体
Phospho-cdc25A (Ser293)    磷酸化细胞分裂周期蛋白25抗体
CDC27    后期促进复合蛋白3抗体
phospho-CRK (Ser41)    磷酸化CRK抗体
K Cadherin    钙粘蛋白6抗体
Cadherin like 23    钙粘蛋白23抗体
CDR2    小脑变性相关蛋白2抗体
CRK7    细胞分裂周期2相关蛋白激酶7抗体
CPa(Clostridium perfringens alpha toxin)    A型产气荚膜梭菌(魏氏梭菌)
phospho-CK18(Ser34)    磷酸化细胞角蛋白18抗体
Cytosine deaminase    胞嘧啶脱氨酶抗体
C2GNT3    C2GNT3蛋白抗体
phospho-c-Jun(Thr239)    磷酸化原癌基因c-Jun抗体
phospho-c-Jun(Thr249)    磷酸化原癌基因c-Jun抗体
CYFRA21-1     肿瘤标志物CYFRA21-1抗体
phospho-c-Jun(Thr91)    磷酸化原癌基因c-Jun抗体
Cyclin A1    周期素A1蛋白抗体
CDKN3    细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白3抗体
样本处理及要求:
1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。 注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。 需要而未提供的试剂和器材: 1.酶标仪（450nm） 2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 3.37℃恒温箱 4.蒸馏水或去离子水

注意事项:
1.严格按照规定的时间和被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多，而且其操作中有一定的技术要求，在检测过程中除正常反应外，有时常见到一些错误的结果。引起ELISA测定错误结果的原因主要有：
①标本因素；
②试剂因素；
③操作因素。

特点:
1、适用于血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
2、可检测动物类型丰富：人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、兔、猪、犬、牛、绵羊、鸡、虾、鱼等。
3、可检测指标齐全：白介素，干扰素，肺炎衣原体，血管紧张素，炎症因子、血管生成素、动脉粥样硬化因子、趋化因子、生长因子基质金属蛋白酶、脂肪因子等等指标。
自备材料:
1）蒸馏水。
2）加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3）振荡器及磁力搅拌器等。
安全性:
1）避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2）实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3）不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

操作步骤
1）使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。 2）根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。
3）加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
4）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
5）每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
6）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
7）每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
8）取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
9）在450nm波长处测定各孔的OD值。
进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2.洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3.消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。
4.底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。
5.避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6.在储存和温育时避免强光直接照射。
7.平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8.任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
9.不能使用过期产品。
10.如果可能传播疾病，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。