小鼠骨成型蛋白1ELISA试剂盒

小鼠骨成型蛋白1ELISA检测试剂盒说明书实验原理:
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人1-磷酸鞘氨醇（S1P）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人1-磷酸鞘氨醇（S1P）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

FAM102B    FAM102B蛋白抗体
FAM104B    FAM104B蛋白抗体
FAM107A    肾细胞癌下调蛋白1抗体
Factor VIII    凝血因子8/第八凝血因子/第八因子相关抗原抗体
FOLR2    胎盘叶酸受体蛋白2抗体
FAM13B1    FAM13B1蛋白抗体
FUT8    岩藻糖转移酶8抗体
FNIP1    卵泡刺激素结合蛋白1抗体
FHL2    相互作用蛋白FHL2抗体
FADS1    脂肪酸去饱和酶1抗体
FABP6    回肠脂肪酸结合蛋白抗体
FABP4    脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白
FAR2    脂肪酰辅酶A还原酶2抗体
FXR2    脆性X相关蛋白样2抗体
FAAH2    脂肪酸酰胺水解酶2抗体
Frizzled 7    卷曲蛋白FZD7抗体
FMDV Polyprotein (VPg2 protein)    口蹄疫病毒A型抗体
Phospho-FAK (Tyr925)    磷酸化粘着斑激酶抗体
human Fibrinogen    人纤维蛋白原抗体
FIZ1    锌指蛋白798抗体
FKBP10    肽基脯氨酰顺反异构酶FKBP10抗体
FKBP11    肽基脯氨酰顺反异构酶FKBP11抗体
FKBP135    FKBP135蛋白抗体
FKBP25    肽基脯氨酸异构酶酶FKBP25抗体
FKBP38    肽基脯氨酸异构酶酶FKBP8抗体
phospho-FOXL2 (Ser263)    磷酸化叉头蛋白L2抗体
FOXN2    叉头蛋白N2抗体
phospho-FOXO1A (Ser322 + Ser325)    磷酸化叉头蛋白家族1抗体
Phospho-FoxO1 (Ser329)    磷酸化叉头蛋白家族1抗体
FKBP6    旋转异构酶FKBP6抗体
TMA16    4号染色体开放阅读框43抗体
FLNB    细丝蛋白3抗体
FLNC    细丝蛋白2抗体
phospho-FLNC (2233)    磷酸化细丝蛋白2抗体
小鼠骨成型蛋白1ELISA检测试剂盒说明书Phospho-FLT3 (Tyr599)    磷酸化FMS样酪氨酸激酶3抗体
FMN1    肢体畸形相关蛋白FMN1抗体
FMO3    二甲基苯胺单加氧酶3抗体
FMO5    二甲基苯胺单加氧酶5抗体
phospho-FMRP (Ser500)    磷酸化脆性X综合征相关蛋白AFF1抗体
FN3K    果糖胺-3激酶抗体
FNBP3    甲精结合蛋白3抗体
FNDC3A    Ⅲ型纤维连接蛋白域蛋白3A抗体
FNDC4    Ⅲ型纤维连接蛋白域蛋白4抗体
FNIP2    卵泡刺激素结合蛋白2抗体
FPGS    叶酸盐多谷氨酸合成酶抗体
FOPNL    胚胎干细胞相关蛋白FOPNL抗体
phospho-Fos B (Ser27)    磷酸化癌基因FOS蛋白B抗体
FOXD2    叉头蛋白D2抗体
FOXE3    叉头蛋白E3抗体
FOXF2    叉头蛋白F2抗体
FOXH1    叉头蛋白H1抗体
FOXI1    叉头蛋白I1抗体
phospho-FOXO4 (Thr451)    磷酸化叉头蛋白4抗体
FOXRED1    单跨膜蛋白FOXRED1抗体
FOXRED2    FOXRED2蛋白抗体
FPGT    岩藻糖1磷酸鸟苷酰转移酶抗体
FREM1    细胞外基质蛋白FREM1抗体
FRAT1    原癌基因FRAT1抗体样本处理及要求:
1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。 注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。 需要而未提供的试剂和器材: 1.酶标仪（450nm） 2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 3.37℃恒温箱 4.蒸馏水或去离子水

注意事项:
1.严格按照规定的时间和被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多，而且其操作中有一定的技术要求，在检测过程中除正常反应外，有时常见到一些错误的结果。引起ELISA测定错误结果的原因主要有：
①标本因素；
②试剂因素；
③操作因素。

特点:
1、适用于血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
2、可检测动物类型丰富：人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、兔、猪、犬、牛、绵羊、鸡、虾、鱼等。
3、可检测指标齐全：白介素，干扰素，肺炎衣原体，血管紧张素，炎症因子、血管生成素、动脉粥样硬化因子、趋化因子、生长因子基质金属蛋白酶、脂肪因子等等指标。
自备材料:
1）蒸馏水。
2）加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3）振荡器及磁力搅拌器等。
安全性:
1）避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2）实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3）不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

操作步骤
1）使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。 2）根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。
3）加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
4）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
5）每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
6）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
7）每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
8）取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
9）在450nm波长处测定各孔的OD值。
进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2.洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3.消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。
4.底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。
5.避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6.在储存和温育时避免强光直接照射。
7.平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8.任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
9.不能使用过期产品。
10.如果可能传播疾病，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。