小鼠肥大细胞类胰蛋白酶ELISA试剂盒

小鼠肥大细胞类胰蛋白酶ELISA检测试剂盒说明书实验原理:
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人1-磷酸鞘氨醇（S1P）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人1-磷酸鞘氨醇（S1P）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

小鼠氨酰tRNA合成酶复合多功能相互作用蛋白1(AIMP1)ELISA试剂盒    ，英文名：    AIMP1 ELISA Kit
小鼠氨基己糖苷酶Bβ(HEXβ)ELISA试剂盒    ，英文名：    HEXβ ELISA Kit
小鼠氨基己糖苷酶Aα(HEXα)ELISA试剂盒    ，英文名：    HEXα ELISA Kit
小鼠氨基端前心钠肽(NT-ProANP)ELISA试剂盒    ，英文名：    NT-ProANP ELISA Kit
小鼠氨基端前脑钠素(NT-ProBNP)ELISA试剂盒    ，英文名：    NT-ProBNP ELISA Kit
小鼠阿黑皮素原(POMC)ELISA试剂盒    ，英文名：    POMC ELISA Kit
小鼠δ样蛋白1同源物(δLK1)ELISA试剂盒    ，英文名：    δLK1 ELISA Kit
小鼠γ-内啡肽(γEP)ELISA试剂盒    ，英文名：    γEP ELISA Kit
小鼠γ-谷氨酰转移酶1(γGT1)ELISA试剂盒    ，英文名：    γGT1 ELISA Kit
小鼠γ-氨基丁酸A受体α2(γABRα2)ELISA试剂盒    ，英文名：    γABRα2 ELISA Kit
小鼠γ-氨基丁酸(γABA)ELISA试剂盒    ，英文名：    γABA ELISA Kit
小鼠β-血小板球蛋白(βTG)ELISA试剂盒    ，英文名：    βTG ELISA Kit
小鼠β细胞素(βTC)ELISA试剂盒    ，英文名：    βTC ELISA Kit
小鼠β-位淀粉样前体蛋白裂解酶1(βACE1)ELISA试剂盒    ，英文名：    βACE1 ELISA Kit
小鼠β-内啡肽(βEP)ELISA试剂盒    ，英文名：    βEP ELISA Kit
小鼠β-骨胶原交联(βCTx)ELISA试剂盒    ，英文名：    βCTx ELISA Kit
小鼠β2-微球蛋白(β2M)ELISA试剂盒    ，英文名：    β2M ELISA Kit
小鼠α-生育酚转运蛋白(TTPα)ELISA试剂盒    ，英文名：    TTPα ELISA Kit
小鼠α-乳清蛋白(αLA)ELISA试剂盒    ，英文名：    αLA ELISA Kit
小鼠α-内啡肽(αEP)ELISA试剂盒    ，英文名：    αEP ELISA Kit
小鼠α-骨胶原交联(αCTx)ELISA试剂盒    ，英文名：    αCTx ELISA Kit
小鼠α-胞衬蛋白(SPTAN1)ELISA试剂盒    ，英文名：    SPTAN1 ELISA Kit
小鼠α白蛋白(AFM)ELISA试剂盒    ，英文名：    AFM ELISA Kit
小鼠α2-纤溶酶抑制因子(α2PI)ELISA试剂盒    ，英文名：    α2PI ELISA Kit
小鼠α2-巨球蛋白(α2M)ELISA试剂盒    ，英文名：    α2M ELISA Kit
小鼠α2-HS糖蛋白(αHSG)ELISA试剂盒    ，英文名：    αHSG ELISA Kit
小鼠α1-微球蛋白(α1M)ELISA试剂盒    ，英文名：    α1M ELISA Kit
小鼠α1-酸性糖蛋白(α1AGP)ELISA试剂盒    ，英文名：    α1AGP ELISA Kit
小鼠α1-抗胰蛋白酶(α1AT)ELISA试剂盒    ，英文名：    α1AT ELISA Kit
小鼠肥大细胞类胰蛋白酶ELISA检测试剂盒说明书小鼠Zeste同源物增强子1(EZH1)ELISA试剂盒    ，英文名：    EZH1 ELISA Kit
小鼠YY肽(PYY)ELISA试剂盒    ，英文名：    PYY ELISA Kit
小鼠X-射线修复交叉互补蛋白6(XRCC6)ELISA试剂盒    ，英文名：    XRCC6 ELISA Kit
小鼠X-射线修复交叉互补蛋白5(XRCC5)ELISA试剂盒    ，英文名：    XRCC5 ELISA Kit
小鼠X-框结合蛋白1(XBP1)ELISA试剂盒    ，英文名：    XBP1 ELISA Kit
小鼠Wolfram综合征蛋白1(WFS1)ELISA试剂盒    ，英文名：    WFS1 ELISA Kit
小鼠WNT1诱导信号通道蛋白1(WISP1)ELISA试剂盒    ，英文名：    WISP1 ELISA Kit
小鼠WAP四二硫化物核心域蛋白1(WFDC1)ELISA试剂盒    ，英文名：    WFDC1 ELISA Kit
小鼠V-Rel网状内皮增生病毒癌基因同源物B(RELB)ELISA试剂盒    ，英文名：    RELB ELISA Kit
小鼠V-Rel网状内皮增生病毒癌基因同源物A(RELA)ELISA试剂盒    ，英文名：    RELA ELISA Kit
样本处理及要求:
1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。 注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。 需要而未提供的试剂和器材: 1.酶标仪（450nm） 2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 3.37℃恒温箱 4.蒸馏水或去离子水

注意事项:
1.严格按照规定的时间和被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多，而且其操作中有一定的技术要求，在检测过程中除正常反应外，有时常见到一些错误的结果。引起ELISA测定错误结果的原因主要有：
①标本因素；
②试剂因素；
③操作因素。

特点:
1、适用于血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
2、可检测动物类型丰富：人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、兔、猪、犬、牛、绵羊、鸡、虾、鱼等。
3、可检测指标齐全：白介素，干扰素，肺炎衣原体，血管紧张素，炎症因子、血管生成素、动脉粥样硬化因子、趋化因子、生长因子基质金属蛋白酶、脂肪因子等等指标。
自备材料:
1）蒸馏水。
2）加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3）振荡器及磁力搅拌器等。
安全性:
1）避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2）实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3）不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

操作步骤
1）使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。 2）根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。
3）加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
4）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
5）每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
6）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
7）每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
8）取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
9）在450nm波长处测定各孔的OD值。
进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2.洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3.消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。
4.底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。
5.避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6.在储存和温育时避免强光直接照射。
7.平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8.任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
9.不能使用过期产品。
10.如果可能传播疾病，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。