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- 库存:
100
- 细胞类型:
贴壁生长
- 物种来源:
详见说明书
- 免疫类型:
详见说明书
- 细胞形态:
成纤维细胞
- 运输方式:
电询
- 年限:
详见说明书
- 生长状态:
详见说明书
- 规格:
5*10^5
2) 细胞鉴定:卵泡刺激素受体(FSHR)免疫荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5) 细胞生长方式:不规则细胞,贴壁培养。
细胞传代步骤:
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞复苏步骤: 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。运输和保存视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1) 1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2) T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
注意事项:
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
5. 该细胞只可用于科研。
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文献和实验以及L-谷氨酰胺0.06 g/L配制而成。应用液是在基础液内补加15%的胎牛血清、青霉素100IU/ml、链霉素100μg/ml,并用5% NaHCO3 调节pH至7.0—7.2。 实验方法: 1. 切取角膜内皮层组织:以人眼为材料培养角膜上皮细胞时,最好取自胎儿的眼角膜。因为成年人眼角膜细胞在体外培养时,生长活力不如胎儿眼角膜细胞; ①摘取眼球1只,用升汞溶液与庆大霉素生理盐水消毒液交替冲洗2次,以洗去眼球表面残留的血污并作初步消毒处理; ②无菌条件下,于角膜缘内侧
本病是由角膜内皮异常所引起的一组疾病,其病变包括角膜水肿,角膜内皮膜增生,房角粘连,虹膜萎缩性改变和继发青光眼。本病好发于20—30岁女性。单眼发病,无遗传倾向。患者有单眼视力模糊及不适感。80%以上患眼都有角膜内皮、虹膜、房角异常改变及青光眼。早期用药物常能控制眼压,但随着病变不断发展,青光眼及角膜水肿逐渐加重,最终需行滤过手术及角膜移植术。 临床表现 1.不同程度的角膜水肿; 2.继发青光眼; 3.虹膜萎缩、瞳孔移位和虹膜孔形成。 诊断
细胞治疗是细胞和基因治疗的重要组成部分,它通过使用特定类型的细胞来修复、替换或调节受损的组织和器官。在细胞治疗中,不同类型的细胞因其独特的生物学特性而被广泛应用于多种疾病的治疗。以下是一些常用的细胞类型及其在细胞治疗中的应用。 (1)免疫细胞 免疫细胞是细胞治疗中最重要且研究最多的细胞类型之一,主要包括 T 细胞、自然杀伤细胞(NK 细胞)和树突状细胞(DC 细胞)。 T 细胞:T 细胞是人体免疫系统的核心细胞,具有强大的抗肿瘤能力。CAR-T 细胞疗法是目前最成功的免疫细胞治疗技术
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