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胆囊成纤维细胞

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  • 上海一研
  • 进口、国产
  • EY-Y10381
  • 2025年07月13日
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      100

    • 细胞类型

      贴壁生长

    • 物种来源

      详见说明书

    • 免疫类型

      详见说明书

    • 细胞形态

      成纤维细胞

    • 运输方式

      电询

    • 年限

      详见说明书

    • 生长状态

      详见说明书

    • 规格

      5*10^5

    胆囊成纤维细胞保存:4℃保存一年,-20℃长期保存
    用途:可用于科研实验培养某一类型细胞没有固定的培养条件。
    产品细节图片1
    Kit  人白介素1α     96T
    HABP(Mouse Hya]uronate binding protein) ELISA Kit  小鼠透明质酸结合蛋白     96T
    CyPA(Mouse cyclophilin A) ELISA Kit  小鼠嗜环蛋白/亲环素A     96T
    IL-1sR II (Human soluble interleukin-1 receptor II ) ELISA kit  人白介素1可溶性受体Ⅱ     96T
    BMPs ELISA Kit  大鼠骨形成蛋白     96T
    IL-1sR I (Human soluble interleukin-1 receptor ) ELISA kit  人白介素1可溶性受体Ⅰ     96T
    RBP-4 ELISA Kit  大鼠视黄醇结合蛋白4     96T
    BMP-6(Mouse Bone morphogenetic protein 6) ELISA Kit  小鼠骨形成蛋白6     96T
    6-keto-PGF1a ELISA Kit  大鼠6酮前列腺素F1a     96T
    Mouse lymphocyte factor ELISA Kit  小鼠淋巴细胞因子     96T
    IL-16(Human Interleukin 16) ELISA KIT  人白介素16     96T
    IL-13(Human Interleukin 13) ELISA KIT  人白介素13     96T
    Pentosidine ELISA Kit  大鼠戊糖素     96T
    ADH/VP/AVP(Mouse antidiuretic hormone/vasopressin/arginine vasopressin) ELISA Kit  小鼠抗利尿激素/血管加压素/精氨酸加压素     96T
    AcSDKP(Mouse N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro) ELISA Kit  小鼠N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸     96T
    AGEs ELISA Kit  大鼠晚期糖基化终末产物     96T
    IL-12/P70(Human Interleukin 12) ELISA KIT  人白介素12     96T
    IL-11(Human Interleukin 11) ELISA KIT  人白介素11     96T
    NGAL ELISA Kit  大鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白     96T
    PA-IgG/M/A(Mouse platelet antibodies IgG/M/A) ELISA Kit  小鼠抗血小板抗体IgG/M/A     96T
    FN(Mouse Fibronectin) ELISA Kit  小鼠纤连蛋白     96T
    Hp-IgG ELISA Kit  大鼠幽门螺旋菌IgG     96T
    IL-10(Human Interleukin 10) ELISA KIT  人白介素10     96T
    ER ELISA Kit   大鼠雌激素受体     96T
    IGFBP-4(Human insulin-like growth factors binding protein 4) ELISA Kit  人胰岛素样生长因子结合蛋白4     96T
    Flt3(Mouse FMS-like tyrosine kinase 3) ELISA Kit  小鼠FMS样酪氨酸激酶3     96T
    IGFBP-3(Human insulin-like growth factors binding protein 3) ELISA Kit  人胰岛素样生长因子结合蛋白3     96T
    IGFBP-1(Mouse Insulin-like growth factor binding protein 1) ELISA Kit  小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1     96T
    胆囊成纤维细胞Beta-DF ELISA Kit  大鼠β-防御素     96T
    IGFBP-2(Mouse Insulin-like growth factor binding protein 2) ELISA Kit  小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2     96T
    D1R ELISA Kit  大鼠多巴胺D1受体     96T
    IGFBP2(Human insulin-like growth factors binding protein 2) ELISA Kit  人胰岛素样生长培养操作
    1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
    2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
    1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
    2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
    3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
    4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
    3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
    1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
    2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
    产品细节图片2
    注意事项:
    1. 收到细胞后先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们。
    2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
    3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
    4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。
    5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和公司技术部沟通交流。
    6. 该细胞只能用于科研,不得用于临床应用。
    实验步骤:
    1. 将解剖用的剪刀、镊子和刀片进行无菌消毒。
    2. 将怀孕小鼠用颈椎脱位法处死,将其固定在解剖板上。
    3. 用70%乙醇喷洒在小鼠的腹部进行消毒,用一把剪刀和一把镊子把孕鼠外皮剪开,用另外一把剪刀和一把镊子把内皮剪开,露出子宫,最后用第三把剪刀和镊子将子宫小心取出放在盛有PBS的玻璃平皿中,冲洗去血。
    4. 用两把弯镊子将胚胎外的胞膜小心去除,然后夹掉头和内脏,将其余胚胎转移到一个装有30 mLPBS的50 mL离心管中,轻轻颠倒两次,倒掉PBS,再重复此步骤一次,留少许PBS,将胚胎转移到另一装有PBS的平皿中,用手术刀片将其切碎至可用微量移液器吸取。
    5. 用200μL的微量移液器反复快速吹打平皿中的液体,放在15 mL离心管中,
    4℃ 1500 r/min离心5 min,倒掉上清液,加10 mL胰蛋白酶,重悬沉淀,37℃水浴中消化30 min,且每隔5 min轻轻晃动,使之充分消化。
    6. 将上层细胞悬液倒入一装有10 mL DMEM培养基的50 mL离心管中,用200目尼龙滤网过滤后,1 500 r/min离心5 min,弃去上清液。
    7. 用移液管吸取30 mL DMEM培养基,让培养液沿离心管壁缓缓流入管底,1 500 r/min离心5 min,弃掉上清液。重复一次此步骤。 8. 将细胞沉淀用15 mL培养基悬起。细胞计数(8只14天胎鼠可获得(2~3)×107个细胞)。
    9. 将3×106个细胞悬浮于15 mL含10%小牛血清的DMEM培养基中,接种到200 mL的培养瓶中。
    10. 24 h后更换新鲜的含10%小牛血清的DMEM培养基。
    11. 细胞长满后,弃掉培养基,用PBS小心冲洗,倒掉,加胰蛋白酶消化。
    12. 轻轻晃动细胞培养瓶,见有细胞浮起,立即加入2 mL血清终止消化,用移液管把细胞轻轻悬起,混匀,使细胞成为单细胞悬液。
    13. 1500 r/min离心5 min。弃掉上清液。加入10 mL含小牛血清的DMEM培养基,悬起细胞,按1:5传代。
    14. 细胞再次长到覆盖率80%~90%,将其消化后,常规冻存(冻存液要现配)。
    15. 实验结果:可拍照存留。

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