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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 供应商:
上海莼试
- 检测范围:
5ng/mL~160ng/mL
- 检测方法:
ELISA
- 应用:
1
- 适应物种:
详见说明书
- 标记物:
详见说明书
- 样本:
Hepcidin
- 规格:
48T/96T
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被检测试剂盒抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的2检测试剂盒呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
操作步骤
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
结果判断
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
试剂盒性能
1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2. 灵敏度:检测范围1-50ng/mL,检测浓度小于1.0 ng/mL。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6个月
Phospho-p70 S6 Kinase Beta 2 磷酸化核糖体S6蛋白激酶β2抗体
Phospho-p70 S6 Kinase Beta 磷酸化核糖体S6蛋白激酶β2抗体
Phospho-p70 S6 Kinase Beta 磷酸化核糖体S6蛋白激酶β2抗体
phospho-P70 S6 Kinase beta 2 磷酸化核糖体S6K2蛋白激酶抗体
phospho-P53 磷酸化肿瘤抑制基因P53抗体
phospho-P53 磷酸化肿瘤抑制基因P53抗体
phospho-P53 磷酸化肿瘤抑制基因P53抗体
phospho-P53 磷酸化肿瘤抑制基因P53抗体
phospho-P53 磷酸化肿瘤抑制基因P53抗体
phospho-P53 磷酸化肿瘤抑制基因P53抗体
phospho-P53 磷酸化肿瘤抑制基因P53抗体
phospho-P53 磷酸化肿瘤抑制基因P53抗体
p73 alpha p53相关蛋白P73α抗体
p53 DINP1 p53诱导核蛋白1抗体
plant lectin B4 植物凝集素IB4
PIG3 p53诱导蛋白3抗体
PRMT4 组蛋白精氨酸甲基转移酶CARM1抗体
PPAP2C 磷酸脂磷酸水解酶2抗体
p107 视网膜母细胞瘤样蛋白p107抗体
phospho-P53 磷酸化肿瘤抑制基因P53抗体
PIGR 多聚免疫球蛋白受体抗体
PCDHB16 原钙粘蛋白16抗体
PRDM2 锌指蛋白RIZ1抗体
PRMT6 组蛋白精氨酸甲基转移酶6抗体
PRSS8 丝氨酸蛋白酶8抗体
phospho-PAK1/2/3 磷酸化p21激活激酶1/2/3抗体
人铁调素检测试剂盒Prostaglandin dehydrogenase 1 前列腺素脱氢酶1抗体
phospho-PRKCZ 磷酸化蛋白激酶C抗体
phospho-P53 磷酸化肿瘤抑制基因P53抗体
phospho-PAK1 磷酸化p21激活激酶1抗体
phospho-PAK2 磷酸化p21激活激酶2抗体
phospho-PAK3 磷酸化p21激活激酶3抗体
phospho-PAK1+PAK2+PAK3 磷酸化p21激活激酶1/2/3抗体
phospho-P70 S6 Kinase beta 磷酸化核糖体S6蛋白激酶抗体
PROK1/PRK1/EG-VEGF 内分泌腺衍生血管内皮生长因子抗体
PERK 蛋白激酶样内质网激酶抗体
PMSA 前列腺特异膜抗原抗体抗体
PI3 kinase p85 alpha subunit 磷脂酰肌醇激酶抗体
PLGF 胎盘生长因子抗体
PKA alpha + beta 蛋白激酶A抗体
PKC beta 1 + 2 蛋白激酶C beta 1/2抗体
PLGF 胎盘生长因子抗体
PLGF 胎盘生长因子抗体
PMP22 外周髓鞘蛋白-22抗体
Podoplanin 平足蛋白抗体
PP-1B 蛋白磷酸酯酶-1B抗体
PP2A alpha + beta 蛋白质磷酸酶-2A抗体
PPP4C 磷酸酯酶-2Ac抗体
Phospho-P38 MAPK 磷酸化-丝裂原活化蛋白激酶p38抗体
PPAR delta + beta D型-过氧化酶活化增生受体抗体
PPAR gamma 过氧化酶活化增生受体γ抗体
progesterone receptor 孕激素受体抗体
PHD3 脯氨酸羟化酶抗体
presenilin 1 早老素蛋白-1抗体
presenilin 1 早老素蛋白-1抗体
presenilin 1 早老素蛋白-1抗体
PSCA 前列腺干细胞抗原抗体抗体
PSD95 突触后密度蛋白95抗体
P-selectin/CD62p P选择素抗体
PTEN 一种肿瘤抑制基因抗体
AMPK alpha-1 腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1/AMPK α 1抗体
protein C 维生素K依赖的蛋白C重链抗体
Plexin A1 神经丛蛋白A1抗体
PAK4 p21激活激酶4抗体
Phospho-PAK4 + PAK5 + PAK6 磷酸化p21激活激酶4/5/6抗体
Phospho-PAK1 + PAK2 磷酸化p21激活激酶1/2抗体
Phospho-PAK1 + PAK2 + PAK3 磷酸化p21激活激酶1/2抗体
Phospho-PAK2 磷酸化p21激活激酶2抗体
PLCG 2 磷酯酶Cγ2抗体
Phospho-PDGFRA 磷酸化血小板源性生长因子受体-α抗体
Phospho-PDGFRA 磷酸化血小板源性生长因子受体-α抗体
P73 protein P73肿瘤抑制基因抗体
PCGF1 表观抑制因子Polycomb家族成员PCGFl蛋白抗体
P2Y10 G蛋白偶联嘌呤受体p2y10抗体
PACAP-27/38 腺苷酸环化酶激活肽-27/38抗体
p19ARF p19ARF抑癌基因抗体
CDKN1A p21蛋白抗体
P2Y1 P2Y1受体抗体/嘌呤受体抗体
P311 protein 神经再生相关蛋白抗体
P38 MAPK 丝裂原活化蛋白激酶p38α抗体
proCNP 促尿钠排泄肽前体C抗体
PAP2c 磷脂酸磷酸酶2C抗体
PAX1 配对盒基因1抗体
PAX2 配对盒基因2抗体
PAK2 p21激活激酶2抗体
PLC beta 3 磷酯酶Cβ3抗体
Phospho-PEA15 磷酸化星形胶质细胞PEA15抗体
Phospho-PEA15 磷酸化星形胶质细胞PEA15抗体
Pan Cytokeratin 广谱细胞角蛋白PCK抗体
Pectinesterase 果胶酶抗体
PRPF4 PRPF4蛋白抗体
Penicillin G 青霉素G抗体
Phospholipase C beta 1 磷酯酶Cβ1抗体
PSRC1 富含脯氨酸/丝氨酸卷曲螺旋蛋白1抗体
p47-phox NADPH氧化酶活化蛋白p47抗体
Proteasome 19S S7 蛋白酶体PRS7抗体
Proteasome 20S C2 蛋白酶体PSMα1抗体
Proteasome 20S alpha 2 蛋白酶体PSMα2抗体
Proteasome 20S alpha 6 蛋白酶体PSMα6抗体
PSMA7 蛋白酶体PSMα7抗体操作注意事项
1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3. 标准品稀释液即可视为阴性对照或者空白;预处理后的样本无需稀释,直接取10μL加样即可。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
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