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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 供应商:
上海莼试
- 检测范围:
0.25ng/ml8ng/ml
- 检测方法:
ELISA
- 应用:
0.1
- 适应物种:
详见说明书
- 标记物:
详见说明书
- 样本:
nicotinamide phosphoribosyltransferase
- 规格:
48T/96T
保存:2-8℃ 有效期:六个月 每个试剂盒操作都是不同的,实验开始前请仔细阅读说明书。本公司长期代做人、大鼠、小鼠、兔子、豚鼠、猪、鸡、犬、猴子、羊、牛等种属elisa实验。
实验室专用:
性状:盒装
产品规格:96T/48T。
主要成分:酶标板,试剂,品等
经营种类:进口分装和原装、国产
试剂盒保存:2-8℃低温保存
有效期:6个月
标本:、、细胞上清液、、、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
检测种属:人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检剂盒等种属。
适用范围:此试剂盒仅用于科研实验,禁用于临床
预期应用:ELISA法定量测定、、细胞上清或其它相关生物中的含量.
运输方面:现货供应,一般为快递运输,江浙沪隔天到,外地及偏远地方三至五天时间到货。
代测,从标本收集、保存、预试验、实验、数据分析等全实验提供完整的技术指导。
蛋白激酶C亚性D型抗体
磷酸化µ-型受体抗体
磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶1/2抗体
基质金属蛋白酶9抗体
染色体及有丝分裂蛋白MIS12抗体
单羧酸转运蛋白-1抗体
线粒体核糖体蛋白L11抗体
促血管平滑肌细胞分化因子抗体
跨膜结构域4亚家族成员2抗体
磷酸化致癌基因C-Myc抗体
肌收缩蛋白MYOT抗体
磷酸化丝裂原活化蛋白激酶MAP4K4抗体
环指蛋白59抗体
磷酸化丝裂原活化蛋白激酶MAP4K4抗体
甲羟戊酸激酶抗体
甲羟戊酸脱羧酶抗体
胞浆苹果酸酶1抗体
组织相容性复合体蛋白1抗体
微丝相关蛋白3样抗体
微粒体甘油三酯转运蛋白
单酰甘油脂肪酶抗体
致癌基因n-Myc抗体
多药耐药相关蛋白3抗体
线粒体转录终止因子1抗体
蛋白激酶MST2抗体
DNA结合蛋白C抗体
胃粘液素抗体
促黑细胞激素γ抗体
甲基抗体
结肠癌相关蛋白MIC1抗体
组织相容性复合体β抗体
小鼠尼克酰胺磷酸核糖转移酶检测试剂盒Myc基因肺癌相关蛋白抗体
糖蛋白gp330抗体
磷酸化肌原调节蛋白抗体
造血祖细胞激酶1抗体
丝裂原活化蛋白激酶MAP4K4抗体
磷酸化转化生长因子β活化激酶结合蛋白1抗体
磷酸化转化生长因子β活化激酶结合蛋白1抗体
磷酸化丝裂原活化蛋白激酶3抗体
磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶2抗体
磷酸化肌细胞特异性增强因子2D抗体
磷酸化肌细胞特异性增强因子2D抗体
磷酸化丝裂原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2抗体
磷酸化p38调节/激活蛋白激酶抗体
磷酸化p38调节/激活蛋白激酶抗体
磷酸化造血祖细胞激酶抗体
p38调节/激活蛋白激酶抗体
肌细胞特异性增强因子2D抗体
磷酸化丝裂原活化蛋白激酶MAP4K4抗体
磷酸化丙氨酸蛋白激酶C底物Marcks抗体
髓易位基因相关蛋白1抗体
巴德-毕德氏综合征蛋白BBS6抗体
有丝分裂驱动蛋白样2抗体
微原纤维胶原相关蛋白1抗体
减数分裂核分裂蛋白1抗体
肌原调节抑制蛋白抗体
双微体2癌基因结合蛋白抗体
基质金属蛋白酶20
多药耐药相关蛋白8抗体
多药耐药相关蛋白7抗体
磷酸化卡波西氏肉瘤疱疹病毒潜伏核抗原抗体相互作用蛋白1抗体
酪氨酸蛋白激酶细胞分裂素抗体
卡波西氏肉瘤疱疹病毒潜伏核抗原抗体相互作用蛋白1抗体
黑色素瘤抗原抗体F蛋白家族1抗体
糖蛋白GNTVA抗体
IGFBP2结合蛋白/迁移和侵润抑制蛋白抗体
微管相关蛋白1B抗体
错配修复蛋白3抗体
神经元膜糖蛋白锚定蛋白2抗体
MYRIP蛋白抗体
髓磷酯髓鞘蛋白1抗体
巨噬细胞克隆刺激因子抗体
膜相关环指蛋白4抗体
肌球蛋白轻链激酶抗体
单极纺锤体蛋白激酶1抗体
有丝分裂阻滞缺陷2样蛋白2抗体
单胺氧化酶B抗体
微小染色体维持缺陷蛋白4抗体
自噬微管相关蛋白轻链3抗体 样本处理及要求
1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放 于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟,或将标 本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃ 保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
一、样本
样本处理原则:所有的样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),如果以后碰到其他的样本,也按这个,纳入汇总表。
1、:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存中如出现沉淀,应再次离心。
2、:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞上清:检测性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的缓冲液溶解,蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用破碎,离心取上清。
1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
(1)的细胞
A、动物细胞:用PH7.2-7.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存中如有沉淀形成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2-7.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的,充分破碎细胞,以使细胞并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2-7.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎破碎细胞。
3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测蛋白,直接取上清检测,细胞内蛋白,要破碎细胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2-7.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测蛋白,直接取上清检测,细胞内蛋白,要破碎细胞。
5.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、加入样品体积9倍的提取液(pH?7.4?PBS缓冲液),3、?请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清并暂时保存于4度待用。
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重点实验室陈崇教授团队在 Nature Cancer 杂志发表研究论文 KMT2C deficiency promotes small cell lung cancer metastasis through DNMT3A-mediated epigenetic reprogramming。 该研究构建了小细胞肺癌小鼠模型,利用多组学分析和体内功能研究,阐明了组蛋白甲基转移酶 KMT2C 缺失通过组蛋白-DNA 协同低甲基化促进 SCLC 远端转移的表观遗传学机制! 图 2:来源 Nature
瘤细胞发生融合,形成杂交瘤细胞。 3、选择性培养 选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞,一般采用HAT选择性培养基。在HAT培养基中,未融合的骨髓瘤细胞因缺乏次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶,不能利用补救途径合成DNA而死亡。 未融合的淋巴细胞虽具有次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶,但其本身不能在体外长期存活也逐渐死亡。 只有融合的杂交瘤细胞由于从脾细胞获得了次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶,并具有骨髓瘤细胞能无限增殖的特性,因此能在HAT培养基中存活和增殖。 4、杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆
制备单克隆抗体骨髓瘤细胞的选择 目前可用于制备McAb的骨髓瘤细胞系较多,这些细胞经药物8-AG、5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)或6-巯基鸟嘌呤(6-TG)诱导出酶缺陷型细胞系。如缺乏次黄嘌呤一鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT),因为HGPRT+ 细胞利用8-AG后,合成毒性核苷酸而死亡,只有HGPRT- 细胞能在含8-AG的培养液中生长,或缺乏胸腺嘧啶核苷激酶(TK)和次黄嘌呤-腺嘌呤磷酸核糖转移酶(HAPRT)等,这些细胞系不能通过补救途径合成DNA,只能通过主要途径合成
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