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- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 供应商：
上海莼试
- 检测范围：
0.25ng/mL8ng/mL
- 检测方法：
ELISA
- 应用：
0.1
- 适应物种：
详见说明书
- 标记物：
详见说明书
- 样本：
TRP2
- 规格：
48T/96T
实验标本采集必修课：
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
3. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
4. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
5. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
6. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
7. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
与试剂盒有关的一切操作和事项，都严格依照与之相关的说明书上记载的内容而定，说明书之外的任何理由、步骤都不得作为依据。为了保护结果真实有效，应该以英文版说明书为准。
样品制备方法——液体样品：
液体类实验样品包含血清、血浆、尿液、胸腹水、细胞培养上清等。
细胞培养上清：将细胞培养基转移到离心管中，在4℃条件下以1500rpm离心10分钟。立即等分上清液并于-80℃下保存样品。尽可能减少样品冻融。
血清：室温血清自然凝固10-20分钟后，在4℃下以3000rpm离心10分钟。立即等分上清液并于-80℃下保存样品。保存过程中如产生沉淀，应再次离心。避免反复冻融样品。
血浆：收集全血于含抗凝血剂的管中，根据标本的要求选择EDTA，柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，在4℃条件下以3000rpm离心10分钟。立即等分上清液（血浆）并于-80℃下保存样品。避免反复冻融样品。
尿液：用无菌管收集，并在4℃下以10000g离心2分钟。立即等分上清液并于-80℃保存样品。避免反复冻融样品。
唾液：用无菌管收集，并在4℃下以10000g离心2分钟。立即等分上清液并于-80℃保存样品。避免反复冻融样品。
性能:
1．准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
2．灵敏度：最低检测浓度小于10 pg/ml。
3．特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4．重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
贮藏：2-8℃，避光防潮保存。 有效期：6个月
操作步骤
1）使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
2）根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。
3）加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
4）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
5）每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
6）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
7）每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
8）取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
9）在450nm波长处测定各孔的OD值。
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