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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
18
- 英文名:
2-Chloro-3-Nitro-5-Bromo-6-Picoline
- CAS号:
186413-75-2
- 保质期:
2年
- 供应商:
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
250mg
- 英文名:
- 2-Chloro-3-Nitro-5-Bromo-6-Picoline
- 别名:
- 3-溴-6-氯-2-甲基-5-硝吡啶; 2-甲基-3-溴-5-硝基-6-氯吡啶;;5-Bromo-2-chloro-3-nitro-6-picoline; 3-bromo-6-chloro-2-methyl-5-nitropyridine; 2-Chloro-3-nitro-5-bromo-6-picoline; CL0254;
- CAS号:
- 186413-75-2
- 分子式:
- C6H4BrClN2O2
- 分子量:
- 251.465
- 沸点: 306.311℃ at 760 mmHg
- 储存条件: 2-8℃
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文献和实验[原理] DNA是通过异羟基洋地黄毒苷(digoxigenin,Dig)配基标记的脱氧尿嘧啶核苷三磷酸(dUTP)随机插入结合而被标记。dUTP通过间臂连结类固醇半抗原异羟基洋地黄毒苷酸基,形成Dig-dUTP,杂交反应后,杂交的靶DNA通过酶联免疫法与一个抗体复合物[抗异羟基洋地黄毒苷配基碱性磷酸酶复合物(Dig)Ap]结合,接着在5-溴-4氯-3-吲哚磷酸盐(X-磷酸盐)和硝基四氮唑蓝(NBT)存在下,由酶催化反应,在杂交部位形成蓝紫色带或颗粒。 [操作] 1.转移 通过打点吸渍
),dTTP(0.65mmol/L)和Dig-dUTP(0.35mmol/L),pH6.5(20℃)。 7.DNA聚合酶Ⅰ大片段(标记级) 此管内有25μl DNA聚合酶Ⅰ大片段(Klenow),2U/μl。 8.(Dig)AP结合物 此管内有200μl多克隆羊抗地高辛配基Fab-片段,结合有碱性磷酸酶750U/ml。 9.NBT 有两管,每管1.25ml,是溶于70%(V/V)二甲基甲酰胺的硝基蓝四唑盐溶液(75mg/ml)。 10.X-磷酸盐 有两管,每管0.9ml
叶绿素,常使醇提液带较深的绿色,影响反应的进行。故需将叶绿素除去,具体方法如下: 乙醇浸提液在水浴上挥去大部分乙醇(不让乙醇挥尽),再加水适量,使含醇量约20%左右,稍热后即放冷,过滤,滤液即可供试验用,或将滤液在水浴上浓缩至糖浆状,加入95%乙醇10ml溶解再供试验用。 2.鉴别试验: (1)三氯化铁冰醋酸反应(Keller-Kiliani反应):取醇提液或经处理后的CHCl3或醇液1ml,水浴上蒸干,残渣溶于冰醋酸2ml中,加入1%FeCl3乙醇液1滴,混合均匀,倾入干燥小试
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