Ac-LDL/乙酰化低密度脂蛋白 Ac-LDL/乙酰化低密度脂蛋白 Ac-LDL/乙酰化低密度脂蛋白 货号:YT0187 英文名称:Ac-LDL 品牌:伊塔生物 规格:2mg,纯度≥98%分子式:C42H72O14,分子量:801.01,溶解性:DMSO,鉴定方法:液相,性状:白色粉末,熔点:194-197℃,密度:1.33g/cm3,保存条件:2-8℃ 避光,运输料件:2-8℃,保质期:3年,产地:中国,类别:生化试剂,库存:23,用途:仅用于科研实验 Phosphodiesterase I 使用方法: 参考官网:ittabio.com
一,
关于氧化低密度脂蛋白使用说明
泡沫细胞造模
号:YT2469,高氧化(程度)低密度脂蛋白货号:YT1108
伊塔生物科技有限公司提供两种氧化程度的低密度脂蛋白,氧化低密度脂蛋白,货 。
YT2469广泛用于脂代谢研究,能显著增加一些具有吞噬功能的细胞脂质集聚(荷
脂),荷脂超过一定比例形成泡沫细胞(Foam cells),除 YT2469外,我们的乙酰化低密
度脂蛋白(货号:YT0187)也能诱导相应细胞内脂质聚集。
文献上多用大/小鼠原代腹腔分离的单核-巨噬细胞造荷脂细胞模型,新鲜分离的单核-
巨噬细胞膜上含丰富的清道夫受体,可摄取修饰后的低密度脂蛋白:氧化低密度脂蛋白,
乙酰化低密度脂蛋白,大部分文献报道 80-120ug/ml 的 YT2469或 YT0187能在 24-48 小时
诱导理想的泡沫细胞模型。也有更低使用浓度的报道例如:50ug/ml 或以下。我们保证
YT2469和 YT0187在 80-120ug/ml 能在腹腔新鲜分离的巨噬细胞上造模成功。
除原代分离的巨噬细胞外,文献报道较多是 Raw264.7 巨噬细胞和 THP-1 细胞,由于
一些实验室这两种细胞系代数较高或来源复杂,会出现随着代数增加膜上清道夫受体减少
的可能。泡沫细胞造模出现困难,我们建议使用代数低的细胞,最好使用活体原代分离的
巨噬细胞增加造模成功的把握。
二,细胞凋亡的造模
YT2469属于低-中度氧化程度的氧化低密度脂蛋白,对少数脆弱,敏感,实验室自行原
代分离内皮细胞可产生损伤,但对市场上一些动/静脉内皮细胞系, RAW264.7 和 THP-1 诱
导 CCK-8 实验的 OD 值下降效果弱,客户可通过降低培养过程中血清浓度来增加氧化低密
度脂蛋白细胞损伤或诱导凋亡效果,用 0.5-5%的血清,具体要看细胞能耐受多低的血清,
如果细胞能耐受低于 0.5%以下血清,说明其耐受凋亡的能力很强,YT2469可能观察不到
CCK-8 实验 OD 值的下降,更高浓度氧化低密度脂蛋白时甚至有 5-10%的 OD 值增加(孔
板液体体积增加吸光度和氧化应激的双向效果导致)。这类细胞实质上是肿瘤化的细胞
系,建议客户采用毒性更大的化学物质造模。
三,关于脂蛋白的浓度
低密度脂蛋白是大颗粒混合物,核心骨架为 ApB100, 其外部结合了大量的胆固醇,甘
油三酯和其他脂肪分子,低密度脂蛋白无固定分子量,颗粒的平均直径约 25nm,平均质
量超过 2000KD,低密度脂蛋白和修饰后的低密度脂蛋白无法用摩尔计算浓度,文献上多
使用蛋白量来衡量其浓度,即每毫升液体含有多少蛋白质,由于每个 ApB100 分子携带的
脂肪不固定,相同的蛋白质浓度时脂质含量可有较大差别,此外,当低密度脂蛋白纯度不
高时,可能混有高密度脂蛋白或白蛋白,球蛋白,这时蛋白质计算模式就更不准确了。因
此使用绝对蛋白质含量衡定低密度脂蛋白浓度有很大局限。考虑到我们的客户主要利用低
密度脂蛋白来研究脂质代谢,脂质含量是最重要的因素,因此,我们采用 LDL-C 含量来衡
量低密度脂蛋白的浓度:溶液中的每 4.5mM 的 LDL-C 折算于 1mg/ml ,实际上这个时候低
北京伊塔生物科技有限公司
密度脂蛋白对应的蛋白测定浓度已超过了 1mg/ml,可到达 1.5-2.0mg/ml 或更高。我们同时
也为客户提供 BCA 测定的蛋白浓度数据方便客户需要是采用。
四,关于脂蛋白保质期和沉淀的处理。
无论高、低密度脂蛋白还是修饰标记后的脂蛋白都在 2-8 度冷藏长期保存,冷冻和冻融
可永久破坏脂蛋白结构,我们所有的脂蛋白产品都不能冷冻保存。伊 塔 生 物 提供的大部分
脂蛋白有 6 周保质期(YT1108除外),随保存时间推移,脂蛋白可能会聚
集,聚集到一定程度形成沉淀,轻度聚集后的脂蛋白被分散后也可与细胞受体结合并不影
响使用。为了减少脂蛋白颗粒聚集,我们建议:1.轻拿轻放不要剧烈震荡;2.不能冷冻;3.
如果聚集形成,不要用力抽吸,快速抽吸加重聚集,4.现配现用尽快用完。如果客户实验需
要去除沉淀,最简单的办法是用 0.1-0.22um 的无菌针头滤器过滤。
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注意事项:本产品仅用于科研实验,不可用于临床
使用说明:参考官方网站
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