大鼠乳酸脱氢酶LDH检测elisa试剂盒

大鼠乳酸脱氢酶LDH检测elisa试剂盒

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  • ¥1200 - 1800
  • 梵态生物
  • 详见说明书
  • 上海/进口
  • FT-sj30024
  • 2025年07月16日
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    • 详细信息
    • 技术资料
    • 库存

      999

    • 供应商

      上海梵态生物科技有限公司

    • 检测范围

      详见说明书

    • 检测方法

      夹心法、一步法、酶联免疫吸附法等

    • 应用

      用于科学实验,不得用于临床

    • 适应物种

      详见说明书

    • 标记物

      血清、血浆、组织、液体等

    • 样本

      血清、血浆、组织、液体等

    • 规格

      48T/96T

    规格:48T产品价格:¥1200.0
    规格:96T产品价格:¥1800.0
    公司经营的ELISA检测试剂盒种类齐全,可以检测:马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
    均为现货,支持快递包邮,提供免费代测服务。产品说明书(点击这里获取)
    实验原理
    试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被检测指标捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的检测指标呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
    试剂盒组成
    试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存
    说明书 1份 1份  
    封板膜 2片 2片  
    密封袋 1个 1个  
    酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
    标准品 0.3ml×6管 0.3ml×6管 2-8℃保存
    酶标试剂 5 ml×1瓶 10 ml×1瓶 2-8℃保存
    样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
    显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
    显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
    终止液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
    20×浓缩洗涤液 15ml×1瓶 25ml×1瓶 2-8℃保存
    注:标准品浓度依次为:2412、6、3、1.5、0 ng/mL.

    样本处理及要求
    1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
    2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
    3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
    4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
    5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
    6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但避免反复冻融.
    7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

    操作步骤
    1. 标准品的加样:设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
    2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀
    3. 加酶:每孔加入酶标试剂100μl,空白孔除外
    4. 温育:用封板膜封板后置37℃温育60分钟
    5. 配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。
    6. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
    7. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟. 
    8. 终止:每孔加终止50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)
    9. 测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值) 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
    注意事项:
    1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。样本在使用前也要在室温平衡60分钟。
    2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
    3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
    4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
    5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
    6. 底物请避光保存。
    7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
    8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
    9. 本试剂不同批号组分不得混用
    10.  如与英文说明书有异,以英文说明书为准。


    计算

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