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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Pseudomonas syringae pv. syringae
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海康朗生物科技有限公司
- 保存条件:
负20度
- 规格:
50次
Pseudomonas syringae pv. syringae
产品及特点
1. 即开即用,用户只需要提供DNA模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增丁香假单胞杆菌丁香致病变种,与其他病原没有交叉反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次,但只能用于科研。
规格及成分
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | 2×PCR MagicMix | 1 mL(红盖) |
| 试剂二 | 超纯水 | 1 mL(亮黄色) |
| 试剂三 | 丁香假单胞杆菌丁香致病变种 PCR 引物混合液 | 100 μL(白盖) |
| 试剂四 | 丁香假单胞杆菌丁香致病变种 PCR 阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL) |
50 μL(黄盖) |
| 试剂五 | 使用手册 | 1 份 |
自备试剂 样品 DNA。
使用方法 一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化N+2个样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N个样品,则需要做N+2个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加 10μL 丁香假单胞杆菌丁香致病变种 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
3. 对N+2个样品,在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性
对照,故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分:
| 成份 | N+2 个 样品管 |
PCR 阴性 对照 |
PCR 阳性 对照 |
| PCR Magic Mix 3.0 | 各 20μL | 20μL | 20μL |
| 丁香假单胞杆菌丁香致病变种 PCR 引物混合液 |
各2μL | 2μL | 2μL |
| N+2个样品 DNA模板 |
各18μL | -- | -- |
| PCR 阴性对照(水) | -- | 18μL | -- |
| PCR 阳性对照(丁香假单胞杆菌丁香致病变种PCR阳性对照1000倍稀释液) | -- | -- | 18μL |
- 按下表设置 PCR 反应:
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
| PCR 反应 (35 个循环) |
95℃ | 30 sec |
| 55℃ | 30 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 7 min |
- 电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测PCR产物。本产品提供的PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释10倍后重复PCR扩增以排除PCR抑制剂的感染。
本试剂盒适用于各种 RNA制品的反转录反应以及随后的PCR扩增。它采用AMV进行反转录反应,能够获得更长的反转录产物。同时,在20ul反转录体系和50ul PCR反应体系中,还可以一次性得到足够量的PCR产物用于后续的克隆实验。本试剂盒中配置的酶均为进口的酶。RT酶采用进口的AMV,所以cDNA更长,基因的信息保留得更完整!反转录过程中特异的RNase抑制剂可有效降低由于外源RNase污染而导致实验失败的风险。本试剂盒使用方便、快捷,可广泛用于cDNA克隆及目的基因检测等分子生物学实验。
注意:
1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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文献和实验cocovenenans)是我国学者于 1977 年发现的一种高致死性的食源性致病菌,于 1999 年将其划分为唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(Burkholderia gladioli)的一个病原型。 椰毒假单胞菌是兼性厌氧,广泛分布于自然界,易在食品表面生长。最适合的生长温度为 37℃,最适合的产毒温度为 26℃,pH5-7 范围内生长较好。长时间发酵或浸泡,加上炎热和潮湿的环境,很容易导致椰毒假单胞菌的滋生,产生毒性强大的米酵菌酸。 椰毒假单胞菌是革兰阴性杆菌,于 PCFA 培养基 36℃±1℃培养 24
其生命周期的病原体具有易感性。例如,丁香假单胞菌等病原体能够通过释放一种类似茉莉酸的克兰汀来利用茉莉酸受体。在茉莉酸受体的晶体结构的指导下,张和他的同事修改了受体的结合位点,使其仍然能结合茉莉酸(保持生理功能),但不能结合克兰汀,这被证明能抑制丁香的毒力。不幸的是,病原体与宿主之间的关系通常具有高度的特异性,识别每种植物疾病的效应器及其各自的靶点将是一项艰巨的任务——特别是一些最恶劣的病原体,如锈菌,是专性寄生虫,无法培养。然而,幸运的是,植物固有免疫系统已经进化到了这样的水平,从而为识别新的靶点
本文由丁香园站友 xatrixer和chao_he 提供,点此查看详情 科学家表示,细菌将人类分为三种 在20世纪初,科学家发现人类的血液类型可分为四种,每个人必属其中之一。如今科学家又发现了一种给人分类的方法:细菌。每个人体内都有成千上万种不同的细菌,然而最近一个科学家小组宣布,在他们研究的人群里,有三种截然不同的生态环境存在于消化道中。 “这是一个重要的进步。这是我们首次发现人类消化道的生态环境可以划分为不同的类别。” 来自德国海德堡“欧洲分子
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