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- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
TNF-α, Rhesus Macaque
- 规格：
50.0μg
细胞株的培养和传代培养：
用于检测细胞因子的细胞株通常培养于含10％小牛血清和抗生素的培养液中，培养对细胞因子有依赖性的细胞株时还有加入适量细胞因子。在37℃ 5％ CO2 的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养，根据细胞生长特性，在适当的时候进行传代，一般3～4 天传代一次。
悬浮生长细胞的传代：
直接离心后吸去培养上清液，用新鲜培养液稀释悬浮细胞，一般按1：2-1：5 稀释细胞后，分瓶继续培养。
贴壁生长细胞的传代：
吸去培养液，用PBS 洗涤细胞一次，加入消化液，在37℃中消化约3～10 分钟，待细胞开始变圆脱落时，加入新鲜培养液，终止消化液，悬浮和吹打分散细胞。
1000rpm 离心5 分钟，去除上清培养液，用新鲜培养液悬浮细胞。1：2-1：4 稀释细胞后，分瓶继续培养。
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培养操作步骤：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻； 人胚肾细胞,293 [HEK-293]细胞
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加
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文献和实验与建议，原MHC的后两个字母HC改为小写，即Mhc（表6-2和6-3）。 表6-2 灵长类动物主要组织相容性复合体的新、旧命名 动 物 种 名 Mhc 名 称 普 通 科 学 新 名 旧 名 Chimpanzee（小黑猩猩） Pan troglodytes Patr ChLA Gorilla（大黑猩猩） Gorilla gorilla Gogo GoLA Orang-utan（猩猩） Pongo pygmaeus Popy OrLA Rhesus macaque(monkey
Table 1 MHC Class I Alleles Available at the NIH Tetramer Facility (2001) Human alleles Murine Rhesus macaque alleles
反应孔中有气泡，以免影响所测OD值的准确性。 （8） 用不同来源的样品、不同实验室所测得的TNF-α含量不同，正常值标准也难于统一。可进行大样本测定，以X+ 2SD确定自己实验室各种来源检测样品的TNT-α正常值范围。一般ELISA法测定血清标本时，TNF-α参考值范围为4.3+ 2.8μg/L(或4.3+ 2.8ng/ml)。
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