TNF-α, Rhesus Macaque 50.0μg 

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      TNF-α, Rhesus Macaque 

    • 规格

      50.0μg 

    TNF-α, Rhesus Macaque 运输和保存:可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:(1)干冰运输,收到后立即转入液氮冻存或直接复苏;(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
    细胞株的培养和传代培养:
    用于检测细胞因子的细胞株通常培养于含10%小牛血清和抗生素的培养液中,培养对细胞因子有依赖性的细胞株时还有加入适量细胞因子。在37℃ 5% CO2 的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养,根据细胞生长特性,在适当的时候进行传代,一般3~4 天传代一次。
    悬浮生长细胞的传代:

    直接离心后吸去培养上清液,用新鲜培养液稀释悬浮细胞,一般按1:2-1:5 稀释细胞后,分瓶继续培养。 TNF-α, Rhesus Macaque 50.0μg 
    贴壁生长细胞的传代:
    吸去培养液,用PBS 洗涤细胞一次,加入消化液,在37℃中消化约3~10 分钟,待细胞开始变圆脱落时,加入新鲜培养液,终止消化液,悬浮和吹打分散细胞。
    1000rpm 离心5 分钟,去除上清培养液,用新鲜培养液悬浮细胞。1:2-1:4 稀释细胞后,分瓶继续培养。
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    培养操作步骤:
    1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
      2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片); 
    3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
      4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
      5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
      实验要点及说明:
    1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
      2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
      3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 人胚肾细胞,293 [HEK-293]细胞
    4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加

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