- ￥1560
- Sino Biological
- 北京
- 50259-M38HL
- 2025年08月12日
- WB
- HEK293 Cells
- Mouse
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原：
A DNA sequence encoding the mouse PVR (NP_081790.1) (Met1-Arg345) was expressed with the Fc region of mouse IgG2a at the C-terminus.
- 亚型：
见说明书
- 形态：
液体
- 保存条件：
4℃
- 克隆性：
无
- 标记物：
见说明书
- 适应物种：
Mouse
- 保质期：
12个月
- 抗原来源：
见说明书
- 目录编号：
50259-M38HL
- 级别：
免疫学
- 库存：
99
- 供应商：
北京义翘神州科技股份有限公司
- 宿主：
HEK293 Cells
- 应用范围：
WB
- 浓度：
见说明书
- 靶点：
PVR
- 抗体英文名：
Mouse CD155 / PVR CHO Cell Lysate (WB positive control)
- 抗体名：
Mouse CD155 / PVR CHO Cell Lysate (WB positive control)
- 规格：
300 µg
反应种属：Mouse
裂解液靶点：PVR
裂解液应用：WB
裂解液保存条件：Store at 4℃. After re-dissolution, aliquot and store at -80℃.
裂解液产品描述：HEK293 Cell Mouse CD155 / PVR transfected / overexpressed for Western blot (WB) positive control. The whole cell lysate is provided in 1X Sample Buffer (1X modified RIPA buffer+1X SDS loading buffer).
裂解液表达宿主：HEK293 Cells
裂解液制备方法：Cell lysate was prepared by homogenization in ice-cold modified RIPA Lysis Buffer with cocktail of protease inhibitors (Sigma). Cell debris was removed by centrifugation. Protein concentration was determined by Bradford assay (Bio-Rad protein assay, Microplate Standard assay). The cell lysate was boiled for 5 min in 1 x SDS loading buffer (50 mM Tris-HCl pH 6.8, 12.5% glycerol, 1% sodium dodecylsulfate, 0.01% bromophenol blue) containing 5% b-mercaptoethanol, and lyophilized.
裂解液Buffer：Modified RIPA Lysis Buffer: 50 mM Tris-HCl pH 7.4, 150 mM NaCl, 1mM EDTA, 1% Triton X-100, 0.1% SDS, 1% Sodium deoxycholate, 1mM PMSF.
裂解液质控信息：12.5% SDS-PAGE Stained with Coomassie Blue after protein purification.
裂解液使用建议：1. Centrifuge the tube for a few seconds and ensure the pellet at the bottom of the tube. 2. Re-dissolve the pellet using 200μL pure water and boil for 2-5 min. 3. Store the lyophilized cell lysate at 4℃. After re-dissolution, recommend to aliquot it into smaller quantities and store at -80℃.
裂解液稳定性：Samples are stable for up to twelve months from date of receipt.
裂解液使用说明：Western blot (WB): Use at an assay dependent dilution. Other Applications: Not tested.
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文献和实验[3] 将细胞裂解物分离成 RIPA 可溶性和 RIPA 不可溶性组分，发现在两个组分中都可以检测到 TDP-43 的磷酸化片段。同样的，用 RIPA 缓冲液裂解小鼠 MEC 细胞时，磷酸化的 EGFR（pY-1068 EGFR）只在 RIPA 可溶性组分中检测出。然而，磷酸化的 c-Src（pY-416 c-Src）则在 RIPA 可溶性和 RIPA 不可溶组分中都能检测出， 甚至 WT 样品在 RIPA 不可溶组分中的信号比 RIPA 可溶性组分中更强（下图），结果表明如果仅使用 RIPA 可溶性组分
通常需对不同样品抗原的总量进行比较或确定样品中是否存在待测抗原。在此过程中，细胞、组织或其他样品均直接用样品缓冲液破碎，当样品中的染色体DNA被剪切成短片段后，经适当处理即可用于特定的电泳系统。在本例中，样品是以适合于标准的Tris／GlycineSDS-PAGE方式制备的。某些样品需经剪切处理染色体DNA降低其溶液黏度，最简便的方法是超声处理，用浸入式探头或杯型超声器均可。1．对照免疫印迹从细胞裂解液开始就须设置两组对照。包括含有已知抗原的阳性对照样品和能与阴性对照抗体发生反应的细胞裂解物
或者互作蛋白复合物（红色+黄色）洗脱 Step 5：分析检测—Western Blot 或者质谱 常用“黑话” 以上示例图证明了 EDR1 和 EDR4 有相互作用。如果想要设计好实验，先清楚以下常用“黑话”含义。 阳性对照：证实细胞裂解物中确实存在靶蛋白（IP）或者互作蛋白对（co-IP，比如诱饵蛋白X和靶蛋白 Y），即为常说的 input。可直接取抽好的蛋白溶液进行 Western。 阴性对照：用来排除假阳性。IP/co-IP 后靶蛋白或者互作蛋白对都检测到了，固然是值得高兴
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