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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温冷藏
- 保质期:
详见说明书
- 英文名:
Lamp kit for Trypanosoma evansi
- 库存:
100
- 供应商:
上海莼试
- 规格:
50T
需要自备的器材:
1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水 处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。
特点:
1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。
储存条件:
14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
MMP-4(Human matrix metalloproteinase 4) ELISA Kit 人基质金属蛋白酶4 96T
MMP-9/Gelatinase B(Human matrix metalloproteinase 9/Gelatinase B) ELISA Kit 人基质金属蛋白酶9/明胶酶B 96T
NSE(Human Neuron-specific enolase) ELISA Kit 人神经特异性烯醇化酶 96T
CK-MB(Human Creatine Kinase MB isoenzyme) ELISA Kit 人肌酸激酶同工酶MB 96T
PAP(Human Prostatic Acid Phosphatase) ELISA Kit 人前列腺酸性磷酸酶 96T
PGDS(Human Prostaglandin D Synthase) ELISA Kit 人前列腺素D合成酶 96T
PG-C(Human Pepsinogen C) ELISA Kit 人胃蛋白酶原C 96T
PG-A(Human Pepsinogen A) ELISA Kit 人胃蛋白酶原A 96T
PLAUR/uPAR(Human Urokinase-type Plasminogen Activator Receptor) ELISA kit 人尿激酶型纤溶酶原激活物受体 96T
uPA(Human urokinase plasminogen activator) ELISA kit 人尿激酶型纤溶酶原激活物 96T
Tie-2(Human tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2 ELISA Kit 人血管生成素受体/含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶2 96T
MMP-8(Human Matrix metalloproteinase 8/Neutrophil collagenase) ELISA kit 人基质金属蛋白酶8/中性粒细胞胶原酶 96T
(MMP-7(Human Matrix metalloproteinase 7) ELISA kit 人基质金属蛋白酶7 96T
伊氏锥虫LAMP试剂盒MMP-3(Human Matrix metalloproteinase 3) ELISA kit 人基质金属蛋白酶3 96T
MMP-2/Gelatinase A(Human Matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A) ELISA kit 人基质金属蛋白酶2/明胶酶A 96T
MMP-13(Human Matrix metalloproteinase 13) ELISA kit 人基质金属蛋白酶13 96T
MMP-10(Human Matrix metalloproteinase 10) ELISA kit 人基质金属蛋白酶10 96T
MMP-1(Human Matrix metalloproteinase 1) ELISA kit 人基质金属蛋白酶1 96T
Flt3(Human FMS-like tyrosine kinase 3) ELISA Kit 人FMS样酪氨酸激酶3 96T
Flt-3L(Human FMS-like tyrosine kinase 3 ligand) ELISA Kit 人FMS样酪氨酸激酶3配体 96T
ACE(Human Angiotensin converting enzyme) ELISA Kit 人血管紧张素转化酶 96T
AMBP(Human alpha-1-microglobulin/bikunin precursor) ELISA Kit 人α1微球蛋白/bikunin前体 96T
Human podocin ELISA Kit 人Podocin 96T
Human Nephrin ELISA Kit 人肾病蛋白 96T
Alpha1-MG(Human Alpha1-microglobulin) ELISA Kit 人α1微球蛋白 96T
ALB(Human microalbunminuria) ELISA Kit 人尿微量白蛋白 96T
AAA(Human Anti-adrenocortical antibody) ELISA Kit 人抗肾上腺皮质抗体 96T
RANA(Human rheumatoid arthritis associated nuclear artigen) ELISA Kit 人抗类风湿关节炎核抗原 96T
THP(Human T-H glycoprotein) ELISA Kit 人TH糖蛋白 96T
GTE-AGE(Human Glomerular tissue extract-advanced glycosylation end products) ELISA Kit 人肾小球组织糖基化终末产物 96T
UP(Human Proteinuria) ELISA Kit 人尿蛋白 96T
LMP7/PSMB99Human low molecular-weight protein/proteasome beta-type subunit) ELISA Kit 人低分子质量蛋白7/β型蛋白酶体9 96T
Alpha2-MG(Human Alpha2 macroglobulin) ELISA Kit 人α2巨球蛋白 96T
Kim-1(Human Kidney injury molecule 1) ELISA Kit 人肾损伤分子1 96T
AQP-5(Human Aquaporin 5) ELISA Kit 人水通道蛋白5 96T
检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
(1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
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文献和实验和组织液中。有个别种类如枯氏锥虫则寄生在人的细胞内。 除马媾疫锥虫是通过交媾直接传播外,所有寄生在脊椎动物的锥虫均要依赖某些昆虫(如采采蝇等)进行传播。带有锥虫的脊椎动物血液被媒介动物吸食后,锥虫因生活环境改变,在媒介动物消化道中依次经过无鞭毛体或前鞭毛体上鞭毛体和后循环锥鞭毛体几个不同的发育阶段。在媒介动物中只有这种后循环锥虫对宿主才有感染力。当媒介再次叮咬宿主时,便把后循环锥虫输入宿主体内。伊氏锥虫在媒介消化道中不进行任何发育,它靠媒介在吸血后短时间内作机械传播。锥虫主要通过胞饮
锥虫的感染,本文以伊氏锥虫kDNA片段为靶扩增DNA设计引物,确定最适PCR反应条件,建立kDNA片 段的PER扩增技术,应用直接扩增缓冲液(Ampdirect)从感染小鼠的 滤纸 血标本直接PER检测伊氏锥虫。 结果发现,PER扩增伊氏锥虫kDNA片段分子量为364 bp。能检测的最小DNA量是O.06 Pg,与布氏锥虫、 活动锥虫没有交叉反应。应用直接扩增缓冲液不需进行样本
释放酶活;一类是抗体法修饰的热启动酶,如 Champagne Taq ,预变性 95℃30s 即可释放酶活。使用时注意预变性时间,方能获得满意的扩增效果。 2. 选择 Lamp 扩增长片段 大于 5Kb 的长片段又该如何扩增呢?如果实验对保真度的需求不高,那么就可以使用 LAmp DNA 聚合酶。其保真度是 Taq 酶的 6 倍,可扩增超过 20Kb 的基因组、cDNA 片段,对于低拷贝、低纯度、以及不同 GC 含量的模板都具有很高的成功率。 3. 选择高保真酶快速高效扩增 如果实
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