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- 上海一研
- 12.5ng/ml~400ng/ml
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- EY-H99381
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 供应商：
上海一研
- 检测范围：
12.5ng/ml~400ng/ml
- 检测方法：
ELISA
- 适应物种：
人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、兔、猪、犬、牛、绵羊、鸡、虾、鱼等。
- 标记物：
1
- 样本：
TP53 Induced Glycolysis And Apoptosis Regulator
- 规格：
48T/96T
本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中的含量。
有效期：6个月
保存条件：2-8℃
Multi-class antibodies ADM ELISA Kit 大鼠肾上腺髓质素
Multi-class antibodies Beta-EPR ELISA Kit 大鼠β内啡肽受体
Multi-class antibodies CAMK 2 ELISA Kit 大鼠钙/钙调素依赖性蛋白激酶2
Multi-class antibodies HL ELISA Kit 大鼠肝脂酶
Multi-class antibodies N-AChR ELISA Kit 大鼠型乙酰胆碱受体
Multi-class antibodies M-AChR ELISA Kit 大鼠毒蕈碱型乙酰胆碱受体
Multi-class antibodies APC ELISA Kit 大鼠活化蛋白C
Multi-class antibodies GAL ELISA Kit 大鼠甘丙肽/甘丙素
Multi-class antibodies a-Glu ELISA Kit 大鼠α葡萄糖苷酶
Multi-class antibodies ODF ELISA Kit 大鼠破骨细胞分化因子
Multi-class antibodies TLR-9/CD289 ELISA kit 大鼠Toll样受体9
Multi-class antibodies Lep IgG ISA Kit 大鼠钩端螺旋体IgG
Multi-class antibodies HSF1 ELISA Kit 大鼠热休克因子1
Multi-class antibodies BetaOHB ELISA Kit 大鼠β羟丁酸
Multi-class antibodies CYP450 ELISA Kit 大鼠细胞色素P450
Multi-class antibodies GHRP-Ghrelin ELISA Kit 大鼠生长激素肽ghrelin
Multi-class antibodies vaspin ELASA Kit 大鼠内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂
Multi-class antibodies BrdU ELISA Kit 大鼠溴脱氧核苷尿嘧啶
Multi-class antibodies TGF Beta2 ELISA Kit 大鼠转化生长因子β2
Multi-class antibodies CYP2E1 ISA Kit 大鼠细胞
实验所需自备试验器材：
1. 酶标仪（450nm）
2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水
实验结果计算：
绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。
人TP53诱导糖酵解凋亡调节蛋白ELISA检测试剂盒操作流程如下：
（1） 仅用于科研待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液100μl。
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB显色液100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
（12）分别测450nm吸光值W1和630nm吸光值W2，最终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
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文献和实验膜的外侧。Annexin-V是一种35-36KD的钙粒子依赖的磷脂结合蛋白，它对PS具有较高的亲和力。细胞凋亡时，可以和外翻的PS结合，从而可以检测凋亡的细胞。发生死亡的细胞其细胞膜上的PS也外翻，因而也会阳性。因此，常用的凋亡试剂盒除了采用Annexin-V标记之外，还会加一种DNA染料，常用的有PI和7-AAD，由于死亡的细胞膜通透性增高，染料可以进入细胞内和DNA结合，从而可以发荧光，区分出死细胞。下图给出的是在使用FAS单抗诱导前后的检测结果，横坐标是Annexin-V FITC，纵坐标是PI
时样本之间干扰。 Q：说明书上写细胞量为 1~5 × 105 ，细胞量多的话对检测结果有没有影响？ A：建议细胞量最多不要超过 106个，过量的细胞相当于染料被稀释，影响染色和分离效果。一般 2×105 个细胞足够进行凋亡检测了，通常情况下检测 10,000 个细胞就能得到比较好的结果。 Q：是否可以用 PBS 替代凋亡试剂盒里面的 Binding Buffer？ A：不行，Binding Buffer 是必须要加的，Annexin V 与 PS 的结合依赖 Ca2+，Binding
发光基团pNA游离出来，可通过酶标仪或分光光度计（λ=405nm 或400nm）测定其吸光值，通过测定吸光度来检测Caspase的活性。 二、自备试剂 PBS、蛋白定量试剂盒(Bradford法,选用) 三、实验操作指南 1．准备工作： A、 裂解液溶解后混匀，冰浴备用。 B、 裂解液工作液制备：每50 μL裂解液中加入0.5 μL DTT，冰浴备用。 2．样本处理： A、悬浮细胞 1） 诱导完成后的细胞，2000 rpm离心5 min，弃上清，收集细胞，PBS轻轻重悬细胞并计数
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