Translationally-controlled tum

Translationally-controlled tumor protein ELISA Kit需要而未提供的试剂和器材
1. 酶标仪（450nm）
2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水

Phospho-TBK1/NAK (Ser172)  磷酸化NF-κB活化激酶抗体     0.1ml
Tat  细胞酪氨酸转氨酶抗体     0.2ml
Tau protein  微管相关蛋白抗体     0.1ml
TRH  促甲状腺素释放激素抗体     0.1ml
Tau protein  微管相关蛋白抗体     0.1ml
phospho-Tau protein(Thr489)  磷酸化微管相关蛋白抗体     0.1ml
phospho-Tau protein(Ser396)  磷酸化微管相关蛋白抗体     0.1ml
phospho-Tau protein(Ser422)  磷酸化微管相关蛋白抗体     0.1ml
phospho-Tau protein(Ser262)  磷酸化微管相关蛋白抗体     0.1ml
phospho-Tau protein(Ser404)  磷酸化微管相关蛋白抗体     0.1ml
phospho-Tau protein(Thr231)  磷酸化微管相关蛋白抗体     0.1ml
phospho-Tau protein(Ser721)  磷酸化微管相关蛋白抗体     0.1ml
phospho-Tau protein(Ser214)  磷酸化微管相关蛋白抗体     0.1ml
phospho-Tau protein(Ser199)  磷酸化微管相关蛋白抗体     0.1ml
phospho-Tau protein(Ser235)  磷酸化微管相关蛋白抗体     0.1ml
phospho-Tau protein(Thr212)  磷酸化微管相关蛋白抗体     0.1ml
phospho-Tau protein(Thr205)  磷酸化微管相关蛋白抗体     0.1ml
phospho-Tau protein(Ser356)  磷酸化微管相关蛋白抗体     0.1ml
phospho-Tau protein(Ser416)  磷酸化微管相关蛋白抗体     0.1ml
MAP2/MAP-2a.b.c  微管相关蛋白2抗体     0.1ml
Phospho-MAP2(Ser136)  磷酸化微管相关蛋白2抗体     0.1ml
Phospho-MAP2 (Thr1620/1623)  磷酸化微管相关蛋白2抗体     0.1ml
MAP1A  微管相关蛋白1A抗体     0.1ml
Talin  踝蛋白抗体     0.1ml
Phospho-Talin (Ser425)  磷酸化踝蛋白抗体     0.1ml
Translationally-controlled tumor protein ELISA KitTBX2/T-box2  新型抑癌基因抗体     0.2ml
TBX3  转录因子Tbx3抗体     0.2ml
Tbx21/T-bet  T细胞介导的转录调节因子Tbx21抗体     0.1ml
TBX18  转录因子Tbx18抗体     0.2ml
TCEB3/Elongin A  转录延伸因子3抗体     0.1m
Elongin B/TCEB2  转录延伸因子B2抗体     0.1ml
TCF7L2  转录因子7类似物2抗体     0.1ml
TCTP  翻译控制肿瘤蛋白抗体     0.1ml
Phospho-TCTP(Ser46)  磷酸化翻译控制肿瘤蛋白抗体     0.1ml
TDP-43  Tar DNA 结合蛋白43抗体     0.1ml
PHLDA1/TDAG51  T淋巴细胞凋亡相关蛋白TDAG51抗体     0.1ml
TEM1/CD248  内涎蛋白/内皮唾液酸蛋白抗体     0.2ml
ANTXR1/TEM8  肿瘤血管内皮标志物8抗体     0.1ml
phospho-ANTXR1(Tyr382)  磷酸化肿瘤血管内皮标志物8抗体     0.1ml
TERT  端粒酶逆转录酶抗体     0.1ml
phospho-TERT(Ser1125)  磷酸化端粒酶逆转录酶抗体     0.1ml
TTX(5E7)  河豚毒素抗体     1ml
TTX(5E7)  河豚毒素单克隆抗体     1ml
TEP1  端粒酶相关蛋白1抗体     0.2ml样本处理及要求
1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

实验材料与试剂配制：
1. 仪器与材料：酶标仪（使用前预热30分钟），微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水，滤纸。
2. 缓冲液使用：加5ul 的缓冲液于50ul 的样品中，如果样品量不够或者不确定，缓冲液和样品的混合比例不要小于1:10即可。
混匀，静置1小时备用（如果标本是血清或者血浆，此步骤忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液备用。
操作步骤：
1. 取出试剂盒，室温（20-25℃）放置 30 分钟。 2. 分组：取出 96 孔板，根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数，把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准品组（6 个浓度）、空白孔、待测样品组。
注：为减少实验误差，保证准确性，建议设置复孔。
3. 加样：依照标准品的顺序分别加入 50ul 的标准品溶液于空白微孔中；空白对照孔加入 50ul 的蒸馏水；其余微孔中加入 50ul的待测样本。
4. 加酶标溶液：标准品组、待测样本组各孔中加入 100ul 的酶标溶液（空白对照孔除外）。
5. 温育：酶标板用封板纸密封后，放入湿盒内于 37℃恒温孵育 1 小时。
6. 洗板：用稀释后的洗涤液注满每孔，静置 15-30s，充分清洗酶标板 5 次，用吸水纸彻底拍干。 7. 显色：各孔加入显色剂 A 液 50ul 后，再加入显色剂 B 液 50ul。
8. 终止：25-37℃下避光反应 10-15 分钟，加入 50ul 终止液。
9. 读板：在 450nm 波长读取各孔的 OD 值。