OX-2 membrane glycoprotein ELI

OX-2 membrane glycoprotein ELISA Kit需要而未提供的试剂和器材
1. 酶标仪（450nm）
2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水

样本处理及要求
1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

实验材料与试剂配制：
1. 仪器与材料：酶标仪（使用前预热30分钟），微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水，滤纸。
2. 缓冲液使用：加5ul 的缓冲液于50ul 的样品中，如果样品量不够或者不确定，缓冲液和样品的混合比例不要小于1:10即可。
混匀，静置1小时备用（如果标本是血清或者血浆，此步骤忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液备用。
phospho-TEM8 (Tyr382)    磷酸化肿瘤血管内皮标志物8抗体
phospho-ATG4A(Ser100)    磷酸化自噬相关蛋白4A抗体
phospho-ATG4C(Ser166)    磷酸化自噬相关蛋白4C抗体
phospho-ATG16A(Ser213)    磷酸化自噬相关蛋白16A抗体
phospho-AKT3 (Ser472)    磷酸化蛋白激酶AKT3抗体
phospho-ADRB2 (Ser261)    磷酸化能受体β2抗体
phospho-AQP2(Ser261)    磷酸化水通道蛋白2抗体
phospho-ATG3 (Tyr18)    磷酸化自噬相关蛋白3抗体
ALDOB    醛缩酶2抗体
AMY2A    胰腺α淀粉酶抗体
ANKRD11    锚蛋白重复结构域蛋白11抗体
phospho-c-ABL1+2 (Tyr393+429)    磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体
phospho-ATF2 (Thr53)    磷酸化活化复制因子2抗体
AKR1D1    醛固酮还原酶家族1成员D1抗体
ARP4    肝血管生成素相关蛋白抗体
ABHD5    自水解酶结构域5蛋白抗体
ACOT8    酰基辅酶A硫酯酶8
Agpat2    溶血磷脂酸酰基转移酶β抗体
AFP4b    AFP4b蛋白抗体
APOC2    载脂蛋白C2抗体
Apolipoprotein A V    载脂蛋白A5抗体
APOA2    载脂蛋白A2抗体
AGPAT4    溶血磷脂酸酰基转移酶D抗体
APOE3    载脂蛋白E3抗体
ABI3    ABI基因家族2抗体
AARE    氧化蛋白质水解酶
Aconitase 2    铁调节蛋白2抗体
ALDH1    乙醛脱氢酶1型抗体
AFP4a    AFP4a蛋白抗体
ARHGAP32    Rho GTP酶激活蛋白32抗体
Adropin    能量平衡相关蛋白抗体
AEV polyprotein    禽脑脊髓炎病毒AEV抗体
ADCY7    腺苷酸环化酶7抗体
ADCY4    腺苷酸环化酶4抗体
AMPK gamma 1    腺苷酸活化蛋白激酶γ1抗体
AANAT    芳香胺N-乙酰化转移酶抗体
OX-2 membrane glycoprotein ELISA KitADCY8    腺苷酸环化酶8抗体
ADCY10    腺苷酸环化酶10抗体
ADCY5    腺苷酸环化酶5抗体

AICDA    活化诱导胞嘧啶核苷脱氨酶抗体操作步骤：
1. 取出试剂盒，室温（20-25℃）放置 30 分钟。 2. 分组：取出 96 孔板，根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数，把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准品组（6 个浓度）、空白孔、待测样品组。
注：为减少实验误差，保证准确性，建议设置复孔。
3. 加样：依照标准品的顺序分别加入 50ul 的标准品溶液于空白微孔中；空白对照孔加入 50ul 的蒸馏水；其余微孔中加入 50ul的待测样本。
4. 加酶标溶液：标准品组、待测样本组各孔中加入 100ul 的酶标溶液（空白对照孔除外）。
5. 温育：酶标板用封板纸密封后，放入湿盒内于 37℃恒温孵育 1 小时。
6. 洗板：用稀释后的洗涤液注满每孔，静置 15-30s，充分清洗酶标板 5 次，用吸水纸彻底拍干。 7. 显色：各孔加入显色剂 A 液 50ul 后，再加入显色剂 B 液 50ul。
8. 终止：25-37℃下避光反应 10-15 分钟，加入 50ul 终止液。
9. 读板：在 450nm 波长读取各孔的 OD 值。