Mitogen-activated protein kina

Mitogen-activated protein kinase 1 ELISA Kit需要而未提供的试剂和器材
1. 酶标仪（450nm）
2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水

C19orf48    19号染色体开放阅读框48抗体
C19orf50    19号染色体开放阅读框50抗体
C19orf51    19号染色体开放阅读框51抗体
C19orf52    19号染色体开放阅读框52抗体
C19orf55    19号染色体开放阅读框55抗体
C19orf56    19号染色体开放阅读框56抗体
C19orf57    19号染色体开放阅读框57抗体
C19orf61    19号染色体开放阅读框61抗体
C19orf77    19号染色体开放阅读框77抗体
C1D    核DNA结合蛋白C1D抗体
C1orf158    1号染色体开放阅读框58抗体
C21orf66    21号染色体开放阅读框66抗体
CDC42EP3    CDC42效应蛋白3抗体
C7orf 43    7号染色体开放阅读框43抗体
phospho-c-ABL (Tyr115)    磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体
phospho-c-Abl (Thr754 + Thr735)     磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体
phospho-c-ABL (Tyr245)    磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体
phospho-c-ABL(Thr413)     磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体
phospho-c-ABL(Tyr204)    磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体
phospho-c-ABL (Thr754)    磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体
Cenexin1    精子尾部结构蛋白抗体
C5orf19     5号染色体开放阅读框19抗体
C9orf139    9号染色体开放阅读框139抗体
C9orf140    9号染色体开放阅读框140抗体
C9orf142    9号染色体开放阅读框142抗体
C9orf163    9号染色体开放阅读框163抗体
C9orf169    9号染色体开放阅读框169抗体
C9orf173     9号染色体开放阅读框173抗体
C9orf21    9号染色体开放阅读框21抗体
phospho-CK II beta (Ser209)    磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶II β/casein kinase IIβ抗体
CEA    癌胚抗原抗体
CEA    癌胚抗原抗体
CDON    细胞粘附分子相关蛋白/癌基因下调蛋白抗体
CD59    淋巴细胞抗原Ly6c抗体
Cyclin E    周期素E抗体
C7ORF50    7号染色体开放阅读框50抗体
C7orf53    7号染色体开放阅读框53抗体
C7orf59    7号染色体开放阅读框59抗体
C7orf64    7号染色体开放阅读框64抗体
C8orf12    8号染色体开放阅读框12抗体
C8orf31    8号染色体开放阅读框31抗体
C8orf33    8号染色体开放阅读框33抗体
Collagen II    Ⅱ型胶原蛋白抗体
Alx1    软骨蛋白1抗体
CFDP1    颅面部发育蛋白1抗体
CPA3    肥大细胞羧肽酶A3抗体
C1orf105     1号染色体开放阅读框105抗体
CD35    Ⅰ型补体受体抗体（C3b/C4b受体抗体）
CMKLR1    趋化样因子受体1抗体
CMKLR1    趋化样因子受体1抗体
phospho-beta Catenin (Ser33)    磷酸化β-连环蛋白/β-连环素/β链接素抗体
phospho-beta Catenin (Ser37)    磷酸化β-连环蛋白/β-连环素/β链接素抗体
phospho-beta Catenin (Thr41)    磷酸化β-连环蛋白/β-连环素/β链接素抗体
样本处理及要求
1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

Mitogen-activated protein kinase 1 ELISA Kit实验材料与试剂配制：
1. 仪器与材料：酶标仪（使用前预热30分钟），微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水，滤纸。
2. 缓冲液使用：加5ul 的缓冲液于50ul 的样品中，如果样品量不够或者不确定，缓冲液和样品的混合比例不要小于1:10即可。
混匀，静置1小时备用（如果标本是血清或者血浆，此步骤忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液备用。
操作步骤：
1. 取出试剂盒，室温（20-25℃）放置 30 分钟。 2. 分组：取出 96 孔板，根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数，把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准品组（6 个浓度）、空白孔、待测样品组。
注：为减少实验误差，保证准确性，建议设置复孔。
3. 加样：依照标准品的顺序分别加入 50ul 的标准品溶液于空白微孔中；空白对照孔加入 50ul 的蒸馏水；其余微孔中加入 50ul的待测样本。
4. 加酶标溶液：标准品组、待测样本组各孔中加入 100ul 的酶标溶液（空白对照孔除外）。
5. 温育：酶标板用封板纸密封后，放入湿盒内于 37℃恒温孵育 1 小时。
6. 洗板：用稀释后的洗涤液注满每孔，静置 15-30s，充分清洗酶标板 5 次，用吸水纸彻底拍干。 7. 显色：各孔加入显色剂 A 液 50ul 后，再加入显色剂 B 液 50ul。
8. 终止：25-37℃下避光反应 10-15 分钟，加入 50ul 终止液。
9. 读板：在 450nm 波长读取各孔的 OD 值。