Resistin ELISA Kit

Resistin ELISA Kit需要而未提供的试剂和器材
1. 酶标仪（450nm）
2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水

样本处理及要求
1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

实验材料与试剂配制：
1. 仪器与材料：酶标仪（使用前预热30分钟），微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水，滤纸。
2. 缓冲液使用：加5ul 的缓冲液于50ul 的样品中，如果样品量不够或者不确定，缓冲液和样品的混合比例不要小于1:10即可。
混匀，静置1小时备用（如果标本是血清或者血浆，此步骤忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液备用。
THAP2    THAP2蛋白抗体
TRPM5    瞬时受体电位离子通道蛋白5抗体（M亚家族）
TRPM4    瞬时受体电位离子通道蛋白4抗体（M亚家族）
TSARG2    精子形成相关凋亡蛋白2抗体
Transportin 1    转运蛋白1抗体
THAP1    核凋亡因子THAP1抗体
TIA1    细胞毒颗粒相关蛋白TIA-1抗体
THYN1    胸腺细胞核蛋白1抗体
TNFAIP3 interacting protein 3    肿瘤坏死因子α诱导相互作用蛋白3抗体
TRPV3    辣椒素受体3抗体
TEX261    TEX261蛋白抗体
TSHR    促甲状腺素受体抗体
Phospho-TrkA(Tyr674 + Tyr675) + TrkB(Tyr706 + Tyr707)    磷酸化酪氨酸激酶A抗体
TLR3    Toll样受体3抗体
TCRG    T细胞受体γ抗体
Transketolase (CT)    转酮醇酶(转羟乙醛酶)抗体（C端）
TPH    色氨酸羟化酶抗体
TRAIL    肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体抗体
Prealbumin    转甲状腺素蛋白/前白蛋白抗体
TRF1    端粒体复制结合因子1抗体
TrkA    酪氨酸激酶A抗体
TRAF1    肿瘤坏死因子受体相关因子1抗体
Resistin ELISA KitTRAF2     肿瘤坏死因子受体相关因子2抗体
Tau protein    微管相关蛋白抗体
TARDBP    Tar DNA 结合蛋白43抗体
Tenascin C    细胞粘合素(固生蛋白)抗体
TFF3    三叶肽因子3抗体
TFPI-2    组织因子途径抑制剂-2抗体
TGF alpha    转移生长因子α抗体(TGFα)
TGF Beta 1    转化生长因子β1抗体（TGFβ1）
TGF beta 2 Propeptide    转移生长因子β2抗体（TGFβ2）
TGF beta 3 propeptide    转移生长因子β3抗体（TGFβ3）
TGF beta Receptor II    转移生长因子β受体2抗体（TGF-βRⅡ，TGFβRⅡ）
TGF beta Receptor I    转移生长因子β受体1抗体
Thyroid peroxidase    甲状腺过氧化物酶抗体
TRADD    肿瘤坏死因子受体1相关死亡域蛋白抗体
TSARG3    生精细胞凋亡相关基因3抗体
T3    三碘甲狀腺素T3抗体
Thioster-containing protein 1    按蚊硫酯包含蛋白-1抗体
Telomerase Binding Protein, P23    端粒酶结合蛋白P23抗体
TSARG6    生精细胞凋亡相关基因6抗体
Trk C    酪氨酸激酶C抗体(神经生长因子受体的一种)
Trop-2    原肌球蛋白抗体
TSHR    促甲状腺素受体抗体
TSHR (CT)    促甲状腺素受体抗体（C端）
Phospho-TAK1(Thr184 + Thr187)    磷酸化转化生长因子β活化激酶1
Phospho-TBK1 (Ser172)    磷酸化NF-κB活化激酶抗体
Tuberin    马铃薯球蛋白(结节性硬化)抗体
Phospho-Tuberin (Ser1387)    磷酸化马铃薯球蛋白(结节性硬化)抗体
Phospho-Tuberin(Ser939)    磷酸化马铃薯球蛋白(结节性硬化)抗体
Phospho-Tuberin(Tyr1571)    磷酸化马铃薯球蛋白(结节性硬化)抗体
Phospho-TSC2 (Thr1462)    磷酸化马铃薯球蛋白(结节性硬化)抗体
Phospho-Tuberin (Thr927)    磷酸化马铃薯球蛋白(结节性硬化)抗体
phospho-Tau protein(Ser396)    磷酸化微管相关蛋白抗体
TNK1    非受体型酪氨酸蛋白激酶Tnk1抗体
Phospho-TNK1 (Tyr277)    磷酸化非受体型酪氨酸蛋白激酶Tnk1抗体
phospho-TOPO II Alpha (Ser1106)    磷酸化DNA拓普西异构酶Ⅱ抗体操作步骤：
1. 取出试剂盒，室温（20-25℃）放置 30 分钟。 2. 分组：取出 96 孔板，根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数，把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准品组（6 个浓度）、空白孔、待测样品组。
注：为减少实验误差，保证准确性，建议设置复孔。
3. 加样：依照标准品的顺序分别加入 50ul 的标准品溶液于空白微孔中；空白对照孔加入 50ul 的蒸馏水；其余微孔中加入 50ul的待测样本。
4. 加酶标溶液：标准品组、待测样本组各孔中加入 100ul 的酶标溶液（空白对照孔除外）。
5. 温育：酶标板用封板纸密封后，放入湿盒内于 37℃恒温孵育 1 小时。
6. 洗板：用稀释后的洗涤液注满每孔，静置 15-30s，充分清洗酶标板 5 次，用吸水纸彻底拍干。 7. 显色：各孔加入显色剂 A 液 50ul 后，再加入显色剂 B 液 50ul。
8. 终止：25-37℃下避光反应 10-15 分钟，加入 50ul 终止液。
9. 读板：在 450nm 波长读取各孔的 OD 值。