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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 供应商:
上海一研
- 检测范围:
0.78-50 ng/mL
- 检测方法:
ELISA Kit
- 应用:
ELISA Kit
- 适应物种:
详见说明书
- 标记物:
详见说明书
- 样本:
RAC-alpha serine/threonine-protein kinase ELISA Kit
- 规格:
48T/96T
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水
样本处理及要求
1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
Phospholipase C beta 3 磷酯酶Cβ3
PDGF-A 血小板源性生长因子A抗体
PAPOLB 睾丸特异性核苷酸果糖β抗体
C11orf73 11号染色体开放阅读框73抗体
PCYT1A 磷酸转移酶A抗体
Prostaglandin I2 Receptor 前列环素受体抗体
PCDH7 原钙粘蛋白7抗体
PXMP1 过氧化物酶膜蛋白1抗体
Plakophilin 2 桥粒斑菲素蛋白2抗体
PSCDBP 胞粘蛋白结合调节蛋白抗体
PCTAIRE2 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶PCTK2抗体
PDE7A 磷酸二酯酶7抗体
PDE7B 磷酸二酯酶7B抗体
PHOX2A 先天性眼外肌纤维化相关蛋白FEOM2抗体
PHOX2B 神经母细胞瘤蛋白PHOX2B抗体
p35 细胞周期蛋白依赖性激酶5激活因子1抗体
p16 ARC 肌动蛋白相关蛋白2/3复合体亚基5抗体
Puratrophin 1 浦肯野细胞萎缩相关蛋白1抗体
PLEKHG5 凋亡诱导受体PLEKHG5抗体
PPP2R2B/PP2A-B55 蛋白质磷酸酶2A-B55抗体
PPT2 棕榈酰蛋白水解酶2抗体
PQBP1 多谷氨酰胺结合蛋白1抗体
PRRSV 猪蓝耳病病毒抗体
PON3 酶3抗体
PADI2 蛋白质精氨酸亚型2抗体
PCYT2 磷酸转移酶2抗体
PICALM/ 磷脂酰肌醇结合网格蛋白组装蛋白抗体
PPP1R10 丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶1调节亚基10抗体
PET112L 细胞色素氧化酶装配因子PET112抗体
phospho-PKC Epsilon(Ser729) 磷酸化蛋白激酶C抗体 PKC ε
procollagen type IIA Ⅱ型胶原α1 N端前体肽抗体
PMS1 肿瘤错配修复基因PMS1抗体
p400 p400蛋白抗体
PDGFC 血小板源性生长因子C抗体
PDGF-D 血小板源性生长因子D(脊髓源性生长因子B)
PAR3 非典型蛋白激酶C特定相互作用蛋白抗体
PCDHB13 原钙粘蛋白13抗体
PSMC1 26S蛋白酶调节亚型抗体
PCDHB11 原钙粘蛋白β11抗体
PRX 轴周蛋白PRX抗体
PRRSV-GP5 猪蓝耳病病毒GP5蛋白抗体
RAC-alpha serine/threonine-protein kinase ELISA KitPAK1 p21激活激酶1抗体
PDIA2 蛋白质二硫键异构酶抗体
PHD1 脯氨酰羟化酶抗体
Classical swine fever virus 抗猪瘟病毒抗体
PLRP1 胰脂肪酶相关蛋白1抗体
PPP2R3 蛋白质磷酸酶2A亚基3抗体
PARD6B 缺陷性分配同源物β抗体
PPAR Gamma 过氧化酶活化增生受体γ抗体
POC5 细胞中心粒蛋白抗体
PELO PELO蛋白抗体
Properdin P因子/备解素抗体
PSF2 PSF2蛋白抗体实验材料与试剂配制:
1. 仪器与材料:酶标仪(使用前预热30分钟),微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水,滤纸。
2. 缓冲液使用:加5ul 的缓冲液于50ul 的样品中,如果样品量不够或者不确定,缓冲液和样品的混合比例不要小于1:10即可。
混匀,静置1小时备用(如果标本是血清或者血浆,此步骤忽略)。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液备用。
操作步骤:
1. 取出试剂盒,室温(20-25℃)放置 30 分钟。 2. 分组:取出 96 孔板,根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数,把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准品组(6 个浓度)、空白孔、待测样品组。
注:为减少实验误差,保证准确性,建议设置复孔。
3. 加样:依照标准品的顺序分别加入 50ul 的标准品溶液于空白微孔中;空白对照孔加入 50ul 的蒸馏水;其余微孔中加入 50ul的待测样本。
4. 加酶标溶液:标准品组、待测样本组各孔中加入 100ul 的酶标溶液(空白对照孔除外)。
5. 温育:酶标板用封板纸密封后,放入湿盒内于 37℃恒温孵育 1 小时。
6. 洗板:用稀释后的洗涤液注满每孔,静置 15-30s,充分清洗酶标板 5 次,用吸水纸彻底拍干。 7. 显色:各孔加入显色剂 A 液 50ul 后,再加入显色剂 B 液 50ul。
8. 终止:25-37℃下避光反应 10-15 分钟,加入 50ul 终止液。
9. 读板:在 450nm 波长读取各孔的 OD 值。
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文献和实验因为自己实验后期需要使用这方面的技术,所以最近在查阅这方面的资料,想拿出来和大家一起分享.后期会把更详细的东西贴出来.英文水平一般,所以翻译的有点差,请海涵. Rac1 Activation Assay Kit被设计来鉴定贴壁细胞或非贴壁细胞的细胞裂解液中Rac活性数量(i.e. Rac-GTP, rather than the inactive Rac-GDP). 使用的glutathione (GST) pull-down方法,采用GST-agarose beads与有的包含74
licanming 请问有无人用过assaydesigns公司的PKC Kinase Activity Assay Kit(cat NO:EKS-420A)?可否说一下应用的经验?注意事项等?还有,该试剂盒的说明书有几处地方不是很懂,请大家帮忙看一下: 1、To avoid cross contamination, change disposable pipette tips between the addition of each standard
Using Phospho‐Motif Antibodies to Determine Kinase Substrates
.C., Asara, J.M., Lane, W.S., Garner, C.C., and Lienhard, G.E. 2002. A method to identify serine kinase substrates. Akt phosphorylates a novel adipocyte protein with a Rab GTPase‐activating protein (GAP) domain. J. Biol. Chem. 277:22115‐22118
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