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齐一生物
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10 g
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文献和实验phosphorylation)和单体法(Building block approach),如Figure 2所示。前者是在多肽序列合成结束后再在固相载体上对丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸的侧链羟基进行磷酸化,可以在同一次合成中同时得到带有和不带有磷酸化位点的多肽;而后者则将适当保护的磷酸化氨基酸直接引入到多肽序列中,操作较前者更为简单,现已成为磷酸化多肽合成的首选策略。 在采用单体法构建磷酸化多肽时,目前广泛采用的原料为侧链单苄基保护的氨基酸:Fmoc-AA(PO(OBzl)OH)-OH (AA = Ser, Thr
0.1mmol树脂。2)将0.244g生物素溶解于5ml的DMF-DMSO(体积比1:1)溶液中,可以适当加热以加速溶解。3)在上述溶液中加入2.1ml0.45mol/LHBTU/HOBt溶液和0.3mlDIEA。4)将活化生物素溶液加入柱子中,旋转过夜。5)进行二氢茚三酮测试(无色),确认生物素已经与柱子结合。6)用2XDMF-DMSO(1:1)溶液洗涤柱子,去除多余的生物素7)依次用2XDMF和2XDCM洗涤柱子。8)肽段脱离之前,柱子要进行干燥。3、将Fmoc氨基酸装入
Carpino报道的Fmoc(9-芴甲氧羰基)作为α氨基保护基,Fmoc基对酸很稳定,但能用哌啶-CH2CL2或哌啶-DMF脱去,近年来,Fmoc合成法得到了广泛的应用。羧基通常用形成酯基的方法进行保护。甲酯和乙酯是逐步合成中保护羧基的常用方法,可通过皂化除去或转变为肼以便用于片断组合;叔丁酯在酸性条件下除去;苄酯常用催化氢化除去。对于合成含有半胱氨酸、组氨酸、精氨酸等带侧链功能基的氨基酸的肽来说,为了避免由于侧链功能团所带来的副反应,一般也需要用适当的保护基将侧链基团暂时保护起来。保护基的选择既要保证侧链
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