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齐一生物
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25 mg
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文献和实验治杂交) 固相杂交酶联法+PCR极限稀释法 原理:特异性探针包被于微孔板内,与待测核酸产物进行杂交,再用一显色探针与待测核酸的另一区域进行杂交;将一定浓度的标准品计算直线回归方程及绘制标准曲线,根据待测样品显色的光密度值推算出该样品的核酸浓度 捕获探针DNA ― PCR DNA―酶标探针DNA (杂交) (杂交) ―底物显色 优点: 1)排除非特异性扩增所致假阳性 2)在一定浓度范围内核酸模板量与显色光密度值呈良好线形关系 3)信号检测方便 缺点: 存在扩增后的污染 七.荧光定量PCR 主要原理:荧
,两端分别标记一个荧光报告基团和一个荧光淬灭基团,探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收, PCR 仪检测不到荧光信号; PCR 扩增时(在延伸阶段), Taq 酶的 5' - 3' 外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条 DNA 链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与 PCR 产物形成完全同步,这也是定量的基础所在。 由于报告基团是随着 PCR 扩增而逐步释放的,因此整个体系的荧光密度值与扩增的 DNA
,与D2结合的质体醌定名为QA。这里的Q有双重涵义,既是醌(quinone)的字首,又是荧光猝灭剂(quencher)的字首。QA是单电子体传递体,每次反应只接受一个电子生成半醌(semiquinone),它的电子再传递至QB,QB是双电子传递体,QB可两次从QA接受电子以及从周围介质中接受2个H+而还原成氢醌(hydroquinone)QH2。这样生成的氢醌可以与醌库的PQ交换,生成PQH2。放氧复合体(oxygen-evolving complex,OEC)又称M,在PSⅡ靠近类囊体腔的一侧,参与
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