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文献和实验【求助】哪位高手能够告诉我用荧光染色剂fluo-3/AM测量细胞内钙离子浓度应注意什么
g_qhzhang 哪位大侠能够告诉我用荧光染色剂fluo-3/AM测量细胞内钙离子浓度应注意什么?谢过了先 g_qhzhang 之前看到园子里有战友讨论荧光染色剂fura-2觉得非常好,对这方面了解很少,被热心战友推荐用fluo-3/AM,不知两个有何区别,只知是2代和3代,希望得到各位大侠指点。 婷子 fura2 做流式细胞仪检测 fluo3AM 做激光共聚焦好点,但网上看到
作用。在哺乳动物的神经系统中,钙离子是一类重要的神经元胞内信号分子,神经元静息状态下,胞内钙离子浓度约为50-100nM,而当神经元活动的时候,胞内钙离子浓度能上升10-100倍,而钙离子对于突触囊泡释放必不可少;神经元在放电的时候会爆发出一个短暂的钙离子浓度高峰,这意味着神经元钙离子浓度表征突触传递和神经元活动。神经元钙离子浓度表征突触传递和神经元活动示意图因而,神经元钙离子成像技术的原理就是借助钙离子浓度与神经元活动之间的严格对应关系,利用特殊的荧光染料或者蛋白质荧光探针(钙离子指示
Fluo-3-Am为一新型的高度特异性Ca2+荧光指示剂,可以灵敏地反映细胞内游离钙离子浓度的变化,Fluo-3-Am进入细胞后经非特异性酯酶脱去Am酯,成为脂溶的Fluo-3留在细胞内,当Fluo-3与细胞内游离钙结合后,其荧光强度是Fluo-3本身的40倍以上,当用480nm波长激发时,其荧光强度与游离钙离子浓度成正比。具体如下:1、钙荧光探针负载;取细胞悬液,加Fluo-3-Am至10μmol/L,置二氧化碳培养箱中孵育1h,其间轻微振荡3次。离心,去掉多余的染料。再用无钙缓冲液反复洗涤
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