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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
18
- 英文名:
DITHIO-BIS-MALEIMIDOETHANE
- CAS号:
71865-37-7
- 保质期:
2年
- 供应商:
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
5mg
- 文名:
- DITHIO-BIS-MALEIMIDOETHANE
- 别名:
- 二硫基-双马来酰亚胺基乙;1,1'-(Dithiodi-2,1-ethanediyl)bis-1H-pyrrole-2,5-dione;1-[2-[[2-(2,5-Dihydro-2,5-dioxo-1H-pyrrol-1-yl)ethyl]dithio]ethyl]-1H-pyrrole-2,5-dione
- CAS号:
- 71865-37-7
- 分子式:
- C12H12N2O4S2
- 分子量:
- 312.37

- 熔点: 124°C
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文献和实验(Dimaleimide) 能与蛋白质半胱氨酸的硫基反应。首先用 α -巯基乙胺还原蛋白质 (IgG), 并用 N 、 N ‘ -O-苯二马来酰亚胺活化,然后除去多余的试剂,最后使含二马来酰 IgG 与含硫基的 β -半乳糖苷酶连接。具体操作如下:将抗 lgG 抗体溶于 0.1Mol/L pH5.0 醋酸钠缓冲液并对同一缓冲液透析平衡过夜 , 离心除去不溶性物质 , 抗 IgG(14mg/2ml) 与 10ml α -巯基乙胺在 37 ℃ 温育 90min 。过 Sephadex
透析平衡过夜,离心除去不溶性物质,抗IgG(14mg/2ml)与10mlα-巯基乙胺在 37℃ 温育90min。过Sephadex后浓缩使每ml含3.0mg左右的还原抗IgG。在 0℃ 中,按1︰1滴加饱和N 、 、N ‘ -O-苯二马来酰亚胺溶液,混合,于 30℃ 温育20min,过SephadexG 25 柱,除去未反应的二马来酰亚胺。收集二马来酰亚胺“活化”的抗IgG,浓缩使浓度为OD
。 限制性内切酶 是一类非常昂贵的试剂,使用过程中要仔细利用并有严格的计划。每种限制性内切酶都有特定的反应条件,如特别的pH范围,缓冲液组分,温育温度等,具体的使用也可参考有关的工具书或文献或产品说明。一般温度37℃,pH7.5~8.0对大多数酶来讲是适合的,但缓冲液的组分则变化很大,典型的组分应有Tris、NaCl、MgCl2,和巯基试剂(如巯基乙醇或二硫苏糖醇)。 典型的反应体系中包括lμg或更少的DNA和1单位酶以及合适的反应介质。反应总体积通常控制在20和50ul之间
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