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SIGMA D4693-1G 分散酶II 42613-33-

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  • ¥1953
  • Sigma-Aldrich
  • 美国
  • D4693-1G
  • 2025年12月03日
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    • 保存条件

      2-8°C

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    • 英文名

      Dispase® II

    • 库存

      有现货

    • 供应商

      浙江羽翔生物科技有限公司

    • CAS号

      42613-33-2

    • 规格

      1G

    属性

    质量水平

    100

    表单

    lyophilized solid

    比活

    ≥0.5 units/mg solid

    技术

    cell culture | mammalian: suitable
    single cell analysis: suitable

    溶解性

    10 mM NaAc (pH 7.5) and 5 mM CaAc: soluble

    储存温度

    2-8°C

    应用

    来自Sigma的该酶已被用于开发用于离体培养小鼠胚胎乳腺芽的实验方法。它已被用于在从大鼠心脏分离线粒体的过程中对大鼠心脏碎片进行处理。它还被用于通过酶水解来分离牙髓干细胞(DPSC)。这些细胞已与通过外植体方法而分离的DPSC进行了比较,以分析它们的干细胞和分化特性。
    中性蛋白酶® II已用于荧光激活细胞分选(FACS)。它还被用于分离内脏卵黄囊层。
    适用于制备测序用单细胞悬浮液。

    生化/生理作用

    中性蛋白酶®II是一种中性的蛋白酶,可水解非极性氨基酸残基的N-末端肽键。它可用于分离生长在体外的多种组织和细胞。该酶非常温和,不会对细胞膜造成损伤。它还可用于防止悬浮培养物中的细胞结块。该蛋白酶可水解纤连蛋白和IV型胶原蛋白,但不能水解层粘连蛋白、V型胶原蛋白、血清白蛋白或转铁蛋白。中性蛋白酶®II具有切割亮氨酸-苯丙氨酸键的特异性。Ca2+、Mg2+、Mn2+、Fe2+、Fe3+和Al3+ 可灭活分散酶I。EDTA、EGTA、Hg2+ 和其他重金属可抑制该酶活性。每g-mol纯化分散酶I含有1g锌原子。如果通过EDTA或EGTA等螯合剂除去锌成分,则产生无活性的酶蛋白。该酶不受血清抑制。

    外形

    含有乙酸钙和乳糖的冻干粉

    制备说明

    可通过将粉末溶解在含有10 mM NaAc (pH 7.5)和5 mM CaAc的缓冲液中制备50 U/mL的储备溶液。它应当被储存在4 °C。

    分析说明

    该酶初始可以10 mg/ml溶解于50 mM Hepes/KOH pH 7.4, 150 mM NaCl中。 进一步的稀释应当在最适于待解离细胞的培养基中进行。 中性蛋白酶是一种金属蛋白酶,可通过包括Ca2+ , Mg2+, Mn2+以及Fe2+在内的二价阳离子激活。

    其他说明

    除特殊说明,在pH 7.5,37 °C 条件下,一单位的酶每分钟将会水解酪蛋白以产生与1.0 μ摩尔 (181 μg) 酪氨酸等同的颜色(Folin-Ciocalteu试剂提供的颜色)。

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    图标文献和实验
    该产品被引用文献

    Members of Bitter Taste Receptor Cluster Tas2r143/Tas2r135/Tas2r126 Are Expressed in the Epithelium of Murine Airways and Other Non-gustatory Tissues.

    Frontiers in physiology (2017-11-23)
    Shuya Liu, Shun Lu, Rui Xu, Ann Atzberger, Stefan Günther, Nina Wettschureck, Stefan Offermanns
    PMID29163195
    摘要

    The mouse bitter taste receptors Tas2r143, Tas2r135, and Tas2r126 are encoded by genes that cluster on chromosome 6 and have been suggested to be expressed under common regulatory elements. Previous studies indicated that the Tas2r143/Tas2r135/Tas2r126 cluster is expressed in the heart, but other organs had not been systematically analyzed. In order to investigate the expression of this bitter taste receptor gene cluster in non-gustatory tissues, we generated a BAC (bacterial artificial chromosome) based transgenic mouse line, expressing CreERT2 under the control of the Tas2r143 promoter. After crossing this line with a mouse line expressing EGFP after Cre-mediated recombination, we were able to validate the Tas2r143-CreERT2 transgenic mouse line and monitor the expression of Tas2r143. EGFP-positive cells, indicating expression of members of the cluster, were found in about 47% of taste buds, and could also be found in several other organs. A population of EGFP-positive cells was identified in thymic epithelial cells, in the lamina propria of the intestine and in vascular smooth muscle cells of cardiac blood vessels. EGFP-positive cells were also identified in the epithelium of organs readily exposed to pathogens including lower airways, the gastrointestinal tract, urethra, vagina, and cervix. With respect to the function of cells expressing this bitter taste receptor cluster, RNA-seq analysis in EGFP-positive cells isolated from the epithelium of trachea and stomach showed expression of genes related to innate immunity. These data further support the concept that bitter taste receptors serve functions outside the gustatory system.

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