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文献和实验蛋白原。相比Matrigel®基质或I型胶原蛋白,在dECM肝水凝胶中培养的原代人肝细胞明显形成更多的3D结构(C),具有更高的细胞色素P450活性(D),累积更多的糖原(E)。 图6. 原代人成骨细胞培养。原代人成骨细胞在dECM骨水凝胶(6 mg/mL)中培养1小时后,出现了特征性的树突形态。培养7天后,相比Matrigel®基质或I型胶原蛋白,在dECM骨水凝胶中培养的成骨细胞具有更高的碱性磷酸酶活性。 图7. 乳腺癌转移检测。采用dECM水凝胶构建乳腺癌骨转移模型,培养的乳腺
细胞的研究中被普遍采用。 ㈠ 原理 在体外,内皮细胞在内皮细胞生长因子存在的条件下可迅速增殖,并可传代,可作为内皮细胞增殖,细胞因子分泌、表型等研究的模型。 ㈡ 方法 1. 脐带内皮细胞的分离 试剂与器材 (1)胶原酶(Sigma):I型((C-0130),用无血清RPMI 1640配成0.1%(W/V),分装、-20℃保存。 0.1%明胶:称取明胶,用三蒸水配成0.2%(W/V)溶液,37℃水浴溶解,过滤,放4℃备用。(即用过滤法消毒) (2)Cord Buffor 肝星状
包装,3.45MG/ML,按照说明书的提示加了0.023倍体积的氢氧化钠中和,然后补加培养基至胶原终浓度为2.5MG/ML,和细胞沉淀混匀后,置于做好的模型内, 室温下10分钟,37度培养箱内 三个小时后,再加6ML培养基,但二十四小时了,胶仍不凝,有的已经散开了,请问我哪个地方做错了?是氢氧化钠的体积不对么?胶凝了以后应该是白色不透明? 二十四小时是不是就应该凝了?如果错了,是错在哪里了? 答:没有用过BD公司的胶原,但使用过Sigma的I型胶原(固体),一般是自己配制成液态,然后根据需要按一定比例添加
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