庚型肝炎病毒PCR试剂盒

庚型肝炎病毒PCR试剂盒

Hepatitis G Virus(HGV)

产品及特点

庚型肝炎病毒(Hepatitis G Virus，HGV)会引发肝炎，和乙型肝炎病毒相 似，主要经输血等非肠道途径传播，也可存在母-婴传播和医源性传播。单独感 染时临床症状不明显，一般不损害肝脏。主要特征有：过性病毒血症呈隐性感 染；急性肝炎 ALT 升高，黄疸比急性丙肝轻，多数很快恢复可与乙、丙肝病毒 合并感染；病毒持续存在病毒始终处于低滴度状态，少数高滴变，但常无临床 症状；病情迁延随着病毒滴度的波动，ALT 间歇性增高，少数反复发作转成慢 性肝炎；可能引起暴发性肝炎以亚急性重型肝炎多见；肝硬化感染病毒后演变 成肝硬化需较长时间，一旦硬化，病情即急转直下，发展迅速；肝癌少数换者 也可发展成肝癌，与乙、丙肝病毒有协同作用。该病毒对人体生命健康造成严 重损害，因此快速灵敏检测庚型肝炎病毒具有重要意义。本产品就是根据庚型 肝炎病毒保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品，它具有下列特 点： 

 

1. 即开即用，只需要提供病毒 DNA 模板。

2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增庚型肝炎病毒，与其他病原没有交 叉反应。

3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。

4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。

5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次。

6. 本产品只能用于科研。 

庚型肝炎病毒PCR试剂盒规格及成分

编号	成分	规格
试剂一	PCR MagicMix 3.	1 mL（红盖）
试剂二	超纯水	1 mL（亮黄盖）
试剂三	庚型肝炎病毒 PCR 引物混合液	100 μL（白盖）
试剂四	庚型肝炎病毒 （1×10E8 拷贝/μL）	50 μL（黄盖））
试剂五	使用手册	1 份

运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其 他试剂。 

自备试剂 样品 DNA。
 

 

使用方法 一、样品 DNA 的制备

1. 如果有 N 个样品，必须设置 N+2 个提取，多出的一个是 PC（样品制备阳 性对照），一个是 NC（样品制备阴性对照）。可以用 10μL 阳性对照的 1 千倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此 作为 PC。另外用水作为 NC。

2. 用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数寄生虫 DNA 提取 试剂盒兼容。 

二、设置 PCR 反应（40μL 体系）

3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分： 

成分	N+2个 样品管	PCR阴性对照	PCR阳性对照
PCR Magic Mix 3.0	各20 μL	20 μL	20 μL
庚型肝炎病毒 PCR 引物 混合液	各2 μL	2 μL	2 μL
N+2 个样品 DNA 模板	各 18 μL
PCR 阴性对照（水）		18 μL	-
PCR 阳性对照（庚型肝炎 病毒 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液）	-		18 μL

4. 按下表设置 PCR 反应：

过程	温度	时间
预变性	95℃	5 min
PCR反应 （35个循环）	95℃	30 sec
	55℃	30 sec
	72℃	20 sec
最后延伸	72℃	7 min

 

 

三、电泳检测

5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实 验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。

本试剂盒适用于各种 RNA制品的反转录反应以及随后的PCR扩增。它采用AMV进行反转录反应，能够获得更长的反转录产物。同时，在20ul反转录体系和50ul PCR反应体系中，还可以一次性得到足够量的PCR产物用于后续的克隆实验。本试剂盒中配置的酶均为进口的酶。RT酶采用进口的AMV，所以cDNA更长，基因的信息保留得更完整！反转录过程中特异的RNase抑制剂可有效降低由于外源RNase污染而导致实验失败的风险。本试剂盒使用方便、快捷，可广泛用于cDNA克隆及目的基因检测等分子生物学实验。
注意：
1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！