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- 20005
- 2025年12月20日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
在2-8度冷藏保存, 避免光照
- 保质期：
2年
- 英文名：
FluoroQuest™ Anti-fading Mounting Medium with DAPI
- 库存：
现货
- 供应商：
AAT Bioquest
FluoroQuest 防褪色固定介质（含DAPI）
| 货号 | 20005 | 存储条件 | r/l |
| 规格 | 20 mL | ||
| Ex (nm) | 359 | Em (nm) | 457 |
| 分子量 | 溶剂 | Water | |
| 产品详细介绍 | |||
简要概述
具有DAPI的FluoroQuest 是一种水性固定介质，用于保留组织和细胞涂片的荧光。这种封固剂含有抗褪色剂以降低染料的光漂白速率，并以DAPI强化，DAPI是DNA的复染剂。用于原位杂交技术或需要荧光法进行DNA染色的其他方法。DAPI在360 nm处激发并在460 nm处发射，产生蓝色荧光。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的FluoroQuest 防褪色固定介质。
产品说明书
样品实验方案
以下是我们推荐的方案，仅提供指导。具体实验应根据您的特定需求进行修改。
- 预热溶液：从冰箱中取出安装溶液。将瓶子加热至室温，避光。
- 添加溶液：清除样品中多余的液体。向样品中加一滴固定溶液。如果样品在载玻片或组织培养皿上，请小心地将盖玻片放在液滴上，以免产生气泡。如果样品在盖玻片上，请将盖玻片倒在干净的玻璃载玻片上。去除多余的防褪色成分。
- 准备用于成像的样品：固定溶液应孵育2小时至过夜。要长期存放，请用指甲油或塑料密封剂将盖玻片密封在玻片上。已安装的载玻片应在黑暗中于4°C存放，荧光成像将保持稳定数周，样品可以在安装后立即成像。
图示
图1. 甲醛固定，石蜡包埋的人肺腺癌阳性组织的荧光IHC 。用兔抗EpCam抗体对人肺腺癌阳性组织切片进行染色，然后分别与iFluor 488 Styramide （Cat＃45020）染色的聚HRP标记的羊抗兔IgG二抗一起孵育。将组织固定在带有DAPI（Cat#20005）的FluoroQuest 抗褪色固定介质中。
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文献和实验Photobleaching of organic fluorophores: quantitative characterization, mechanisms, protection.
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。 抗体孵育 吸水纸吸掉封闭液，不洗，每张玻片滴加足够量的稀释好的一抗并放入湿盒，4 ℃ 孵育过夜。 加荧光二抗： PBST 浸洗爬片 3 次，每次 3 min，吸水纸吸干爬片上多余液体后滴加稀释好的荧光二抗，湿盒中 37℃ 孵育 1 h，PBST 浸洗爬片 3 次，每次 3 min。 注意：从加荧光二抗起，后面所有操作步骤都尽量在较暗处进行。 固定拍照 复染核：滴加 DAPI 避光孵育 5 min，对标本进行染核，PBST 5 min×4 次洗去多余的 DAPI。 用吸水
定性、半定量或相对定位分析的一种实验方法。 二、实验步骤 1、样本准备 （1）载波片处理 1%盐酸酒精充分浸泡盖玻片，加盖，浸泡 1h 以上。流水冲洗盖玻片（控制流速，勿冲出盖玻片)；灭菌双蒸水洗4-5遍，室温，振荡洗涤；无水乙醇泡3次，每次数分钟；倾去乙醇，放入温度为60°C左右烤箱烘干数小时，高压灭菌烤干； （2）收获分化不同时期细胞。 2、固定及透化 （1）1X PBS 洗一次细胞； （2）室温，4%多聚甲醛固定10 min； （3）1X PBS洗细胞，3次，每次
一抗和二抗与非特异性位点结合。通透后用PBS浸洗玻片3次，每次3 min，吸水纸吸干PBS，在玻片上滴加山羊血清，室温封闭30min。常用的封闭液包括：与二抗同一来源的血清、BSA或者是羊血清。从封闭开始所有的步骤，一定要注意样品的保湿，避免样品的干燥，否则极易产生较高的背景。醛类固定的样品，在用一抗孵育前用含0.3M甘氨酸的封闭液进行封闭。 4. 一抗孵育 根据一抗说明书，按照适当比例用一抗稀释液稀释一抗，用吸水纸吸尽封闭液，每张玻片滴加稀释好的一抗并放入湿盒， 4℃孵育过夜。回收一抗，加入
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